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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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用户胡云云

新虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR检测 已有3人参与

求助各位大神，我的靶标DNA只有17个碱基，你们知道有哪些标准方法可以检测吗？我自己知道的就qPCR，但是我的碱基太少了，引物都不好设计。导师说看能不能在我的靶标上增加碱基，比如ploy A这种，我没在文献里面看到过，感觉不太科学，你们有见过这种做法吗？

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1楼 2020-07-05 18:45:40
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Liu19851225

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以杂交，扩增用PCR体系扩增，但扩增出来的产物不是指数型的
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4楼2020-07-22 15:39:46
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ligation-------------->PCR，  先连接再做PCR吧

不过17个碱基很容易出现背景信号，产生假阳性
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2020-07-05 21:03:52
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用户胡云云

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2020-07-05 21:03:52
ligation-------------->PCR，  先连接再做PCR吧

不过17个碱基很容易出现背景信号，产生假阳性

好的，非常感谢

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3楼2020-07-05 22:20:08
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duanbiao127

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可参考miRNA做qPCR的方法，设计茎环引物，做几轮预扩增，模板延长后即可定量扩增。（关注生物技术控公众号，了解更多生物实验技术）
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5楼2020-08-12 11:01:24
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查看全部 5 个回答
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