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houjinglhy

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[交流] 【交流】晒晒蛋白胶(PAGE)染色液和脱色液的配方

发现蛋白胶染色液和脱色液的配方有很多。
不知道各位用的是什么样子,还有胶的处理方法
大家拿出来讨论下。
首先,我把我们实验室的记下来。

染色液:
考马斯亮蓝R250 1.2g/L ; 甲醇:水:乙酸 (5:4:1 或 4.5:4.5:1)
脱色液:
除不加考马斯亮蓝R250 其他一样。

染色:微波高火15-20S 再染1 h  或 常温 3h-过夜
         回收染料适当延长时间
脱色:脱到能看清
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从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
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houjinglhy

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引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-7-13 17:18:

这个教科书上的配方(脱色液)在实际操作中肯定是不行的,甲醇和冰醋酸浓度太低会导致根本脱不了色,或者脱色太过漫长,

配方
染色液:考马斯亮蓝R-250 2.5g/L 甲醇:水:冰乙酸=4.5:4.5:1
脱色液:同上 ...

刚脱色的胶确实很皱 没法拍照
脱色后的胶一般在水里泡上一天后才能拍照
泡水后胶都会变大很多
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
6楼2009-07-13 17:43:22
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wql1828

木虫 (小有名气)

helix

我们用的是

染色液:
考马斯亮蓝R250 ;   乙醇:水:乙酸 脱色液:
除不加考马斯亮蓝R250 其他一样。

染色: 常温 2h     

脱色:脱一整夜
2楼2009-07-13 15:59:59
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houjinglhy

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引用回帖:
Originally posted by wql1828 at 2009-7-13 15:59:
我们用的是

染色液:
考马斯亮蓝R250 ;   乙醇:水:乙酸 脱色液:
除不加考马斯亮蓝R250 其他一样。

染色: 常温 2h     

脱色:脱一整夜

染色液比例呢 嘿嘿
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
3楼2009-07-13 16:06:52
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jlc0225

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
据《蛋白质技术手册》2001,科学出版社
考马斯亮蓝染液,1L:
R-250 1.0g
甲醇 450ml
蒸馏水 450ml
冰醋酸 100ml
脱色液 1L:
甲醇 100ml
冰醋酸 100ml
蒸馏水 800ml
染色常温 2h
90℃ 30min
脱色常温过夜
90℃ 2h
开始新的学习!
4楼2009-07-13 16:17:29
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