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本子同学

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助大神!垂直板电泳跑DNA不出结果,也不知道问题出在哪里,求解答,拜托~ 已有1人参与

DNA PAGE步骤:
1、        玻璃板用洗洁精、清水、超纯水冲洗后晾干。
2、        将玻璃板安装完成后,检漏。
3、        根据配方配制分离胶。

30%丙烯酰胺   超纯水   5×TBE  10%APSTEMED
8%        3.2ml        6.4ml    2.4ml     200μl     10μl
10%       4.0ml        5.6ml    2.4ml     200μl    10μl
12%       4.8ml        4.8ml    2.4ml     200μl    10μl

5×TBE  
Tris :5.4g  EDTA :0.372g  硼酸:2.75g,溶于100ml超纯水。

4、        混合试剂,待倒掉检漏超纯水,再加入APS和TEMED,同时加入1μl核酸染料,混匀后加入槽中,上层加超纯水,凝固之后倒掉上层水,加入浓缩胶。

30%丙烯酰胺   超纯水   1.0MTris    10%SDS    10%APS   TEMED
5%        860μl       3.4ml      315μl      50μl        50μl       7μl

5、        插入梳子,待凝胶之后拔出梳子,放入电泳槽中后倒入1×电泳缓冲液(10×电泳缓冲液100ml+900ml超纯水+10ml 10%SDS),加入样品(5μl DNA样品+1μl 6×loading buffer),100V,约1.2h。

(胶中间还有条线,也不知道是什么)

求助大神!垂直板电泳跑DNA不出结果,也不知道问题出在哪里,求解答,拜托~


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新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以尝试跑一下DNA marker(15%PAGE胶)

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2楼2021-08-06 11:10:10
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