24小时热门版块排行榜    

查看: 1760  |  回复: 19
当前主题已经存档。

fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR扩增目的条带很谈,也不单一是什么原因,该怎么办?

做了好几次了,PCR扩增目的条带时有时无,有一直很谈,也不单,是怎么回事啊?请教各位

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-11 at 14:08 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

112976553

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
会不会引物的特异性不够好呢?,我最近也在烦这个事情
2楼2009-07-11 10:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶活性不大ok了吧
还有就是引物的问题咯
3楼2009-07-11 10:18:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

txstbbm

铁虫 (小有名气)

若试剂没问题,那就做个梯度PCR看看!
4楼2009-07-11 11:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herwan

木虫 (知名作家)

★游离希★


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很可能是引物的特异性不好
也有可能是退货温度不合适
都会使条带较弱,而且出现非特异性扩增
另外,你跑的应该是琼脂糖胶吧
建议你根据目的片段的大小调整一下胶的浓度
并不是高浓度的胶就一定更好,更有助于条带分开的
还可以适当增加一下上样量,换个孔大的梳子,多点一些样品进去
条带可能会更清晰些
你试试吧~~
最让偶感动的一句话:“如果你愿意,你可以随时离开!"偶就这样被征服了~~~于是心中紧记“生死契阔,与子相悦;执子之手,与子偕老”!
5楼2009-07-11 12:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的内参跑的怎么样啊?你可以把你的退火温度降一下,看看如何。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
6楼2009-07-11 14:11:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

点样的量是不是少了
7楼2009-07-11 15:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muyuan

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是引物特异性不好,或者退火温度不合适,设个温度梯度摸摸合适的退火温度,还有同样条件下做的胶薄一点效果会好一点
8楼2009-07-11 15:20:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猫三两只

金虫 (正式写手)

引物设计的问题
体系不是最优的
退火温度不太适合
9楼2009-07-11 15:40:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

csjiang1123

木虫 (小有名气)

我也遇到这个问题 了 阳性对照很亮 郁闷
10楼2009-07-11 23:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fyn512045 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +8 majunge000 2026-08-11 10/500 2026-08-15 18:55 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见