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验证重组载体已转入宿主菌,诱导后没表达是什么原因啊
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lihaoexe
银虫
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专业: 临床生物化学检验
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验证重组载体已转入宿主菌,诱导后没表达是什么原因啊
如题,而且奇怪的是同时诱导表达的另一个目的基因,效果却很好。同样的时间同样的试剂和仪器,而且两个基因也是同源的,这是为什么啊?
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1楼
2009-07-10 16:14:10
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ganchao1776
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专业: 生物大分子结构与功能
看你的描述,你做的是原核表达吧,表达了可能会是以下几种情况,一,形成了包函体,二,表达的蛋白附着在了细胞膜上,通过与空白菌的全菌蛋白表达谱比较可以知道是不是表达了。如果证明了没有表达我能想到的一个原因就是原核系统不适合你这个酶的表达,不是基因的原因,可能是刚表达的一段氨基酸形成的结构阻止了进一步表达
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8楼
2009-07-11 14:03:45
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zfszheng
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★
lihaoexe(金币
+1
,VIP
+0
):谢谢,但是基因转进去后都测序验证过啊,都很正常,应该不是突变的原因吧
7-10 16:33
可能有突变,导致你有一个基因提前终止。
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2楼
2009-07-10 16:23:51
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zh1987hs
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虫号: 591536
注册: 2008-09-02
性别: GG
专业: 环境生物物理
会不会是这个基因在表达时形成了蛋白包涵体?
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3楼
2009-07-10 16:50:23
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xiangao
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虫号: 679064
注册: 2008-12-21
性别: GG
专业: 生物化工与食品化工
我也遇到类似情况了
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4楼
2009-07-11 00:42:22
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