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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 验证重组载体已转入宿主菌，诱导后没表达是什么原因啊
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lihaoexe

银虫 (小有名气)

[交流] 验证重组载体已转入宿主菌，诱导后没表达是什么原因啊

如题，而且奇怪的是同时诱导表达的另一个目的基因，效果却很好。同样的时间同样的试剂和仪器，而且两个基因也是同源的，这是为什么啊？
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1楼 2009-07-10 16:14:10
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zfszheng

新虫 (小有名气)
★
lihaoexe(金币+1,VIP+0):谢谢，但是基因转进去后都测序验证过啊，都很正常，应该不是突变的原因吧 7-10 16:33
可能有突变，导致你有一个基因提前终止。
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2楼2009-07-10 16:23:51
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zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手
会不会是这个基因在表达时形成了蛋白包涵体？
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3楼2009-07-10 16:50:23
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xiangao

金虫 (正式写手)
我也遇到类似情况了
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4楼2009-07-11 00:42:22
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地图蜗牛

银虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 7-11 08:00
原因很多的吧，还有可能表达了，只是量太少，检测不到而已。
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5楼2009-07-11 02:46:19
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txstbbm

铁虫 (小有名气)
ORF不对，或者是密码子偏好不合适
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6楼2009-07-11 11:16:01
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muchong5577

金虫 (正式写手)
我也遇到这样的情况 一直没想到办法解决 有高人指导下就好了
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7楼2009-07-11 13:58:30
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
看你的描述，你做的是原核表达吧，表达了可能会是以下几种情况，一，形成了包函体，二，表达的蛋白附着在了细胞膜上，通过与空白菌的全菌蛋白表达谱比较可以知道是不是表达了。如果证明了没有表达我能想到的一个原因就是原核系统不适合你这个酶的表达，不是基因的原因，可能是刚表达的一段氨基酸形成的结构阻止了进一步表达
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8楼2009-07-11 14:03:45
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
我也遇到了啦这种情况，以前表达了，现在又不表达。重新转了，试剂也换了，还不见表达，现在重新验证载体
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9楼2009-07-11 15:26:18
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
;问题比较多,不太好说
也曾遇到过这种情况
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10楼2009-07-11 15:37:52
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