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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切的时候两个内切酶可以一起吗可以和连接载体一起吗
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AmaliaWong

新虫 (初入文坛)

[交流] 酶切的时候两个内切酶可以一起吗可以和连接载体一起吗 已有6人参与

我用的是EcoRI-HF和BAMHI-HF第一次做不知道怎么做。。。后面连接载体用的是1304用T4连接酶可以吗体系啥的我都不知道哭了

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1楼 2020-05-19 18:02:46
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爆炒小木虫

新虫 (小有名气)
★
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你查下文献看看有没有人做过

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2楼2020-05-19 19:17:51
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owl2010

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2020-05-20 08:02:46
用CutSmart buffer就可以了。在二种酶的切割效率都是100%。反应体系可以参照说明书。两种酶的用量应该相等且不超过反应体系的10%。比如20ul体系，两种酶最多各加1ul。
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男人的组成要素:金钱、面子、性、怕死、自恋、吹牛逼。
3楼2020-05-19 21:30:01
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2020-05-20 08:08:37
两个酶是否可以一起切需要看酶的说明书，不同的要求不同。

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4楼2020-05-20 08:00:59
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hsk129

新虫 (小有名气)
可以的呢

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5楼2020-05-20 10:00:48
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lansong9783

金虫 (小有名气)
★
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可以，最常用的两个内切酶了
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6楼2020-05-20 10:44:32
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等你的时候

新虫 (初入文坛)
★
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这两个酶可以一起切，很常见的

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7楼2020-05-24 07:24:48
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