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青衿韵

新虫 (正式写手)

[求助] NO生成抑制实验中griess试剂490nm测量空白OD值在0.2,标曲也这样,什么原因?

我用1ug/ml的 lps 刺激小鼠巨噬细胞,在lps刺激细胞24小时的过程中用的是带5%血清和1%双抗的DMEM完全培养液,标曲也是用带5%血清和1%双抗的DMEM完全培养液配置。每孔种板了1.5万个左右的细胞,阳性对照用50 uM的地塞米松和精氨酸。加入promega进口的griess试剂后,用酶标仪测量,因为实验室没有540nm左右的波长,所以用490nm的波长测量。lps阴性对照在0.32左右,空白对照0.24左右,阳性对照在0.22左右,化合物50 uM浓度下OD值为0.24左右。不知道为什么我的空白对照每次OD值都大于0.2了,这次实验空白的OD值比地带米松的值还高。即便是标曲,用带5%血清和1%双抗的DMEM完全培养液配置0uM浓度NaNo2,加格式试剂后OD值也有0.20. 希望有经验的虫友能助我解惑,万分感谢!
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