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liu33feng

[交流] 请大家指点,要做液质,第一次做,大家给点建议。 已有1人参与

是个未知物质 跑板氯仿甲醇8:1  有两个点,还是比较开的,然后想做下液质。可惜以前没做过,问下:
做液质样品浓度大概有什么要求  
如果是反相柱的话 ,流动相是怎么选择的了。
新人,大家多多指教和批评。
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cucupig

银虫 (小有名气)


xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-9 15:04
一般质谱样品含量测定浓度是纳克级的,如果是扫离子一般浓度在1ug/mL~10ug/mL,建议楼主从低浓度试起,浓度太高了残留严重,污染离子源,影响后面测定。
9楼2009-07-09 14:59:55
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awu3pand

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-9 15:02
有机相至少10%,如果有三乙胺等胺类的最好多跑跑基线~16~24h吧,一定要防止盐析出来损伤泵里的宝石杆!
2楼2009-07-08 16:48:50
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awu3pand

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 7-9 00:56
是个未知物质 跑板氯仿甲醇8:1  有两个点,还是比较开的,然后想做下液质。可惜以前没做过,问下:
做液质样品浓度大概有什么要求  
如果是反相柱的话 ,流动相是怎么选择的了。
新人,大家多多指教和批评。

流动相就调甲醇和氯仿比例好了,出峰时间不能太长,但是又要保证杂质峰和主峰的分离度在1.5以上,个人觉得分离度在2.5以上积分比较准~
3楼2009-07-08 16:50:59
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pal2004

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 7-8 21:32
有几点要注意的,供楼主参考
1. 液质因为气化和离子化的问题,你做HPLC时的流速不一定能直接用到LC/MS上,比如常规ESI,要根据离子源的要求,让进入质谱的流速达到满意的范围。一般LC/MS都比较小。
2. 流动相里有些试剂是不能加的,比如三氟乙酸,尽管TFA可以改善保留和峰型,但会淬灭离子信号,所以一般LC/MS不能使用。
还有磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵塞毛细管,所以也不能用。而且缓冲盐也会导致离子抑制,因此流动相的离子强度不要太大。
去污剂、表面活性剂也有离子抑制现象发生,而且表面活性剂产生的加合物会干扰质谱数据。
总之,HPLC时就应该按照LC/MS的要求摸好条件,否则上了液质还有从头摸条件,费时费力。
4楼2009-07-08 18:28:33
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