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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 真核来源的基因表达问题
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 真核来源的基因表达问题

我把真核来源的基因放在啤酒酵母宿主里表达,一定需要用终止子吗,如果不用可以用什么序列来替代呢?
在这个目的基因后面跟着有筛选标记基因（实验室自主研发）,我需要它表达,那也是否需要一个完整的表达盒呢?
具体如下面图所示:

--PGK1启动子--a factor signalP--目的基因前肽＋成熟肽--ADH1终止子--启动子--筛选标记---终止子---

上面很多元件都需要克隆，我觉得很麻烦，请教大家，能不能简化而又能达到试验目的呢？十分感谢！！！！！
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1楼 2009-07-07 13:42:05
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
我用的是线性片段整合插入到染色体DNA上，真核表达载体不多，特别是对啤酒酵母而言吧。
a factor是信号肽，前肽是信号肽和成熟肽之间的部分，两者不是一样的功能吧
请教了！！！
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4楼2009-07-07 18:53:12
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
那我用a factor＋目的蛋白的前肽＋成熟肽这样的结构单元，可以吗？
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6楼2009-07-07 20:27:38
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
如果是原核表达载体上的信号肽，是不是也一样是信号肽＋目的蛋白成熟肽？
不是说去掉前肽，蛋白无法正确折叠吗？
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8楼2009-07-07 21:47:24
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