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荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

[交流] SDS-PAGE制样问题

目的蛋白为分泌表达。
请问发酵液上清应该怎么制样？
菌体离心后，其上清可以直接加上样BUFFER煮吗？
有人说，上清液里含有很多离子和其他杂质这个会影响跑胶吗？

从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！

1楼 2009-07-06 22:08:37

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捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 7-7 08:16

取上清200 uL
加入5X Buffer 50 uL 然后沸水浴 3min。

电泳加样10-20uL，问题不大。

如果不行，就加5-10 uL，可以啦。

【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】

7楼2009-07-07 03:05:33

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