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ly2199

专家顾问 (正式写手)

[交流] 【讨论】关于毛细管电泳缓冲液里面杂质的问题

最近刚刚接触CE,有个奇怪的现象,我用NaOH--H2O--buffer 顺序冲洗柱子之后,没有进样,直接进行分离,想看看柱子冲洗的怎么样?结果没进样的情况下竟然也有样品峰出来。后来我就又冲洗了很长时间,还是有样品峰?难道说明我的样品在柱子上吸附性很强吗?
     后来我就换了一根新的柱子,进行冲洗后,竟然新主子在没有进样的情况下也有样品峰,太奇怪了。后来我把所有的溶液(buffer)都给换成新的了,就正常了,这说明我的buffer或者NaOH等污染了,怎么污染的呢?
     期待大家的解答,谢谢!
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cpn

木虫 (正式写手)

★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
你确定那是样品峰么?会不会是气泡峰?那些峰的出峰情况怎样?
你都没进样,还有样品峰?
2楼2009-07-06 17:44:53
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
如果是你的buffer污染了,会让整个基线背景抬升或背景噪音增大,不会出现单峰的,因为你的buffer是充满整根毛细管的。
根据你的描述,建议你首先检查在电泳过程中电流的情况,有还是无,是不是很稳定,然后在进行下一步的判断。
七窍通了六窍
3楼2009-07-06 18:04:32
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fjcyt

铁杆木虫 (著名写手)


chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
你说的情况我不太明白。如果是一种溶液换另一种溶液冲洗的时候是会出峰的。但是不会一直出峰。你的峰时规律的吗
4楼2009-07-07 07:42:53
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ly2199

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by cpn at 2009-7-6 17:44:
你确定那是样品峰么?会不会是气泡峰?那些峰的出峰情况怎样?
你都没进样,还有样品峰?

应该不会是气泡峰,出的峰很正常,尖尖的。而且所有溶液在使用之前,已经经过脱气了啊
5楼2009-07-07 08:32:02
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ly2199

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by platto at 2009-7-6 18:04:
如果是你的buffer污染了,会让整个基线背景抬升或背景噪音增大,不会出现单峰的,因为你的buffer是充满整根毛细管的。
根据你的描述,建议你首先检查在电泳过程中电流的情况,有还是无,是不是很稳定,然后在进行 ...

在电泳的过程中有电流,但是电流没有以前那么稳定了。
6楼2009-07-07 08:32:59
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nianyue912

木虫 (小有名气)


chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
我在怀疑毛细管的问题。我们这里曾今也莫名奇妙的空管子出峰。你反复求证一下是不是毛细管的问题吧
7楼2009-07-07 11:59:24
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cpn

木虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by ly2199 at 2009-7-7 08:32:

应该不会是气泡峰,出的峰很正常,尖尖的。而且所有溶液在使用之前,已经经过脱气了啊

你已经判定它是样品峰了噢?那它的出峰时间重现性怎样?还有基线如何?整个分析过程中的电流会不会稳定?峰面积重现性如何?
8楼2009-07-07 14:03:12
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padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主


chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
这种峰一般称为ghost peak
既然你把溶液换新了就可以避免的话,那你就用新的呗
我有什么能帮助您的吗?
9楼2009-07-07 14:08:52
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naren4545

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是找到原因好,大家学习!
10楼2009-07-07 14:28:52
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