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ly2199

专家顾问 (正式写手)

[交流] 【讨论】关于毛细管电泳缓冲液里面杂质的问题

最近刚刚接触CE,有个奇怪的现象,我用NaOH--H2O--buffer 顺序冲洗柱子之后,没有进样,直接进行分离,想看看柱子冲洗的怎么样?结果没进样的情况下竟然也有样品峰出来。后来我就又冲洗了很长时间,还是有样品峰?难道说明我的样品在柱子上吸附性很强吗?
     后来我就换了一根新的柱子,进行冲洗后,竟然新主子在没有进样的情况下也有样品峰,太奇怪了。后来我把所有的溶液(buffer)都给换成新的了,就正常了,这说明我的buffer或者NaOH等污染了,怎么污染的呢?
     期待大家的解答,谢谢!
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cpn

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
走缓冲间隔,用水-碱-水冲管,然后再用缓冲冲管达到平衡,看看出峰时间和正常时偏差如何就知道是不是吸附了。
14楼2009-07-08 15:02:21
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cpn

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
你确定那是样品峰么?会不会是气泡峰?那些峰的出峰情况怎样?
你都没进样,还有样品峰?
2楼2009-07-06 17:44:53
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
如果是你的buffer污染了,会让整个基线背景抬升或背景噪音增大,不会出现单峰的,因为你的buffer是充满整根毛细管的。
根据你的描述,建议你首先检查在电泳过程中电流的情况,有还是无,是不是很稳定,然后在进行下一步的判断。
七窍通了六窍
3楼2009-07-06 18:04:32
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fjcyt

铁杆木虫 (著名写手)


chiraler(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论 7-9 12:44
你说的情况我不太明白。如果是一种溶液换另一种溶液冲洗的时候是会出峰的。但是不会一直出峰。你的峰时规律的吗
4楼2009-07-07 07:42:53
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