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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 测多聚半乳糖醛酸酶活
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虫chonny

铜虫 (小有名气)

[求助] 测多聚半乳糖醛酸酶活

对照和样品管水浴出来的颜色都是深红色，我只用多聚半乳糖醛酸溶液加了dns沸水浴五分钟也变深红了，还有就是吸光值负了，这是为什么，求救

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1楼 2020-04-11 13:09:50
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
这个底物是酸性多糖，在高温和碱性dns的共同作用下，被碱水解，生成还原糖。所以这个显色煮沸时间不要太长，5分钟即可

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2楼2020-04-11 21:56:22
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虫chonny

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2020-04-11 21:56:22
这个底物是酸性多糖，在高温和碱性dns的共同作用下，被碱水解，生成还原糖。所以这个显色煮沸时间不要太长，5分钟即可

我准时反应了5min，这个底物和dns本来就会显色的话，那岂不是盖住了样品与dns的颜色了，所以我本来有差别的样品溶液最后显的颜色都一样，而且测吸光值是负的，亲亲我是错在哪里了

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3楼2020-04-11 23:47:44
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
如果你的酶能催化底物的话，本底对照管和样品反应管之间有色差。

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4楼2020-04-12 00:18:56
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