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豆豆1985

[交流] 标准葡萄糖的灭菌问题

有谁可以帮忙分析一下这个培养基:10g/L的葡萄糖,5g/L酵母抽提物,10g/L碳酸氢钠,8.5g/L的磷酸二氢钠。基本没见过有人用该培养基啊。我最近试验中要用到。但是灭菌过程遇到了很多问题:该培养基刚配好是PH=7.8左右。但是灭菌后PH会有很大程度的升高,大概会达到8.6左右,这样就不能用于细菌的培养了,请求帮助。

[ Last edited by amisking on 2009-7-5 at 09:48 ]
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵,我做过将所有的试剂放到超净台的紫外下照半小时,然后就当灭过菌的使用,效果还可以也没有污染。想想本来关着的超净台里面就是空气,都是有菌的,不就照了20min就好了么。
16楼2009-07-09 10:23:37
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烟大考研

金虫 (正式写手)

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0):支持观点! 7-5 10:20
个人认为是高温下碳酸氢钠与磷酸二氢钠反应生产二氧化碳后逸出,剩余的部分大部分为磷酸氢钠和磷酸钠,导致pH升高。建议将10g/L碳酸氢钠,8.5g/L的磷酸二氢钠分别灭菌后再调pH,不过挺有难度啊,可以考虑采用滤膜过滤。
心信其可行,则移山填海之难,终有成功之日;心信其不可行,则反掌折枝之易,亦无收效之期
2楼2009-07-05 09:57:23
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豆豆1985

哦,谢谢。我试试看呢。
3楼2009-07-05 10:07:28
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amisking

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引用回帖:
Originally posted by 烟大考研 at 2009-7-5 09:57:
个人认为是高温下碳酸氢钠与磷酸二氢钠反应生产二氧化碳后逸出,剩余的部分大部分为磷酸氢钠和磷酸钠,导致pH升高。建议将10g/L碳酸氢钠,8.5g/L的磷酸二氢钠分别灭菌后再调pH,不过挺有难度啊,可以考虑采用滤膜 ...

基本上支持这一观点,而且葡萄糖在高温灭菌的时候是会和蛋白质等物质发生美拉得反应的。
而且碳酸氢钠、磷酸二氢钠也是一个ph的缓冲物质,调节的时候有一定的困难。需要多多研究下!
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
4楼2009-07-05 10:22:38
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