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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 接种量问题
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201314zhao

新虫 (初入文坛)

[求助] 接种量问题 已有3人参与

有没有微生物专业的同学？有个问题想请教一下：我的实验步骤分为活化，扩大培养，发酵合成目标物质。扩大培养以5%的比例接入，培养72h后离心转移至发酵合成培养基中，有这么做过的吗？发酵合成的接种量是5%吗？
谢谢！

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1楼 2020-04-06 16:00:21
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Herman_xia

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你应该是经过扩大培养表达目的酶后，再利用目的酶催化转化某种物质成目的产物；如果是这样的话则需要根据菌体的表达量来确定接种量，可以先通过实验验证最适催化转化的菌体浓度，再确定菌体稀释倍数及离心菌液量。
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只有干不死，就往死里干。
8楼2021-07-19 16:26:50
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一个不小心就

金虫 (正式写手)
大肠杆菌的话我们一般用10%接种量。多点少点都可以。发酵培养后的条件控制才是重要的。
如果想找最好的条件，要么自己优化，要么查阅文献。
另外，至少应该提供你的菌种信息。不然别人难以给你有针对性的建议
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2楼2020-04-06 19:26:32
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dreamzhang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为具体什么菌种你没说，这要根据菌种的特性来确定。看你活化72h，我猜你应该是真菌或者放线菌，一般来说发酵接种量2%左右就够了，当然你多接一些也没问题，这个要通过实验来确定。一般时通过压差或者火圈接种，很好奇你这各离心转移时怎么操作的。希望对你有用。
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3楼2020-04-07 13:06:21
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dreamzhang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上面没有说清楚，一般真菌2%左右，放线菌5-10%。
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4楼2020-04-07 13:08:23
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