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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 接种量问题
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201314zhao

新虫 (初入文坛)

[求助] 接种量问题 已有3人参与

有没有微生物专业的同学？有个问题想请教一下：我的实验步骤分为活化，扩大培养，发酵合成目标物质。扩大培养以5%的比例接入，培养72h后离心转移至发酵合成培养基中，有这么做过的吗？发酵合成的接种量是5%吗？
谢谢！

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1楼 2020-04-06 16:00:21
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一个不小心就

金虫 (正式写手)
大肠杆菌的话我们一般用10%接种量。多点少点都可以。发酵培养后的条件控制才是重要的。
如果想找最好的条件，要么自己优化，要么查阅文献。
另外，至少应该提供你的菌种信息。不然别人难以给你有针对性的建议
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2楼2020-04-06 19:26:32
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dreamzhang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为具体什么菌种你没说，这要根据菌种的特性来确定。看你活化72h，我猜你应该是真菌或者放线菌，一般来说发酵接种量2%左右就够了，当然你多接一些也没问题，这个要通过实验来确定。一般时通过压差或者火圈接种，很好奇你这各离心转移时怎么操作的。希望对你有用。
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3楼2020-04-07 13:06:21
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dreamzhang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上面没有说清楚，一般真菌2%左右，放线菌5-10%。
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4楼2020-04-07 13:08:23
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我理解你是不是用菌做生物转化，5%的接种量和楼上的讨论类似，看菌种类；
发酵过程的工艺接种量是看完成目标的效率和菌利用的可持续性来判断的，实验优化。
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5楼2020-04-07 13:33:03
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ObieSoul

新虫 (小有名气)
想咨询一下楼主你是用微生物活性干粉来实验的吗？
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6楼2020-11-27 16:03:13
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hopegate

捐助贵宾 (小有名气)
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7楼2021-05-11 17:25:45
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Herman_xia

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你应该是经过扩大培养表达目的酶后，再利用目的酶催化转化某种物质成目的产物；如果是这样的话则需要根据菌体的表达量来确定接种量，可以先通过实验验证最适催化转化的菌体浓度，再确定菌体稀释倍数及离心菌液量。
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只有干不死，就往死里干。
8楼2021-07-19 16:26:50
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