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hht4275

铜虫 (小有名气)

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W3110中表达吗？

问题一、pTrc99a可以在BL21/rosetta/BW25113/W3110中表达吗？
问题二、pTrc99a构的载体转入W3110后，在抗性平板上能长起来，但PCR没有条带是因为什么？抽质粒基本上也抽不出来。未转质粒的W3110在抗性平板上不长

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爱老婆，爱家人，爱自己，爱你们

1楼 2020-04-04 15:34:00

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soarshining

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5楼: Originally posted by hht4275 at 2020-04-07 09:17:48
pTrc99a构的载体转入W3110后，在抗性平板上能长起来，但PCR没有条带是因为什么？抽质粒基本上也抽不出来。未转质粒的W3110在抗性平板上不长。大神知道这是什么原因吗？该怎么解决。文献里pTrc99a载体是可以转W3110 ...

看结果除非涂板出现污染，否则肯定转进去了，不然不会出现抗性生长。抽质粒是单克隆扩增起来的吗？