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hht4275

铜虫 (小有名气)

[求助] pTrc99a可以在BL21/rosetta/BW25113/W3110中表达吗?

问题一、pTrc99a可以在BL21/rosetta/BW25113/W3110中表达吗?
问题二、pTrc99a构的载体转入W3110后,在抗性平板上能长起来,但PCR没有条带是因为什么?抽质粒基本上也抽不出来。未转质粒的W3110在抗性平板上不长
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soarshining

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引用回帖:
5楼: Originally posted by hht4275 at 2020-04-07 09:17:48
pTrc99a构的载体转入W3110后,在抗性平板上能长起来,但PCR没有条带是因为什么?抽质粒基本上也抽不出来。未转质粒的W3110在抗性平板上不长。大神知道这是什么原因吗?该怎么解决。文献里pTrc99a载体是可以转W3110 ...

看结果除非涂板出现污染,否则肯定转进去了,不然不会出现抗性生长。抽质粒是单克隆扩增起来的吗?
7楼2020-04-07 22:20:42
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biosci

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可以在bl21里面表达,因为这个载体是

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2楼2020-04-04 20:37:21
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biosci

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3楼2020-04-04 20:42:59
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biosci

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启动子是lac,trp杂合启动子,trc启动子,启动活性比t7弱

发自小木虫Android客户端
4楼2020-04-04 20:43:51
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