24小时热门版块排行榜    

查看: 2803  |  回复: 6

信天谨游

新虫 (正式写手)

[交流] BCA蛋白测定,空白吸光度大于样品吸光度的问题。 已有3人参与

再下小虫一枚,望各位有过经验的不吝赐教。
实验目的是测定样品中蛋白浓度计算回收率。会按照同方法做不加样品的管作为空白对照。在BCA 测蛋白浓度时得到的结果确实空白的吸光度大于样品的吸光度。这样算下来样品中含有的蛋白量就是负数了。这是不符合实验的。
(已经扫描过空白样品中所含的物质在紫外区没有吸光度)
若把样品和空白稀释10倍,发现稀释后的吸光度与稀释之前的竟差不多,有几个孔甚至还略高与稀释前的。老师说生物样品就是会出现越稀释越高的现象。
我不太懂。
我现在想知道我该怎么修改实验过程或是换其他方法,能准确测定蛋白浓度呢?望各位老师同学给点高见?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fu251628849

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
之前测蛋白浓度,就是因为空白对照加样时不小心出现了气泡,就出现你说的情况,不知道你的是啥情况?我也做过类似你说的实验,就是空白没有任何东西,只是和处理组的操作过程一样,加了同样的处理试剂,做过不少,但没出现你说的情况。

发自小木虫Android客户端
2楼2020-04-01 21:54:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

信天谨游

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fu251628849 at 2020-04-01 21:54:03
之前测蛋白浓度,就是因为空白对照加样时不小心出现了气泡,就出现你说的情况,不知道你的是啥情况?我也做过类似你说的实验,就是空白没有任何东西,只是和处理组的操作过程一样,加了同样的处理试剂,做过不少,但 ...

感谢回复。下次我注意一下实验操作。

发自小木虫Android客户端
3楼2020-04-01 22:55:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
样品稀释到标曲的中间线性部分最好,另外比色皿洗洗干净,是用sigma那个倒吸的装置(死贵死贵的,一个玻璃架子1000+大洋)配上真空泵抽洗的吗?那样会相对干净些,而且能抽干
Behind the glory is a loneliness
4楼2020-04-09 14:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

信天谨游

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ECUST_CAPF at 2020-04-09 14:55:23
样品稀释到标曲的中间线性部分最好,另外比色皿洗洗干净,是用sigma那个倒吸的装置(死贵死贵的,一个玻璃架子1000+大洋)配上真空泵抽洗的吗?那样会相对干净些,而且能抽干

比色用的96孔板,不会重复用。

发自小木虫Android客户端
5楼2020-04-09 15:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weebug

版主 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有没做一个标准曲线
天蓝蓝兮日头晒
6楼2020-04-10 10:11:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

信天谨游

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by weebug at 2020-04-10 10:11:51
有没做一个标准曲线

有做标准曲线,标准曲线的浓度是正常的。线性也很好。

发自小木虫Android客户端
7楼2020-04-10 10:36:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 信天谨游 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +6 材料学257求调剂 2026-03-23 7/350 2026-03-23 11:05 by laoshidan
[考研] 考研化学308分求调剂 +5 你好明天你好 2026-03-23 6/300 2026-03-23 11:02 by 素颜倾城1988
[考研] 306求调剂 +7 chuanzhu川烛 2026-03-18 7/350 2026-03-23 09:22 by king123!
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
信息提示
请填处理意见