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luckydog52

木虫 (著名写手)

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[交流] 求助：含重组质粒的菌液放4度冰箱时间太长了，怎么抢救！！

含有重组质粒的Bl21菌液忘记保存，三角瓶放在4度的冰箱里两个多月了....
昨天用这个接种，今天居然什么也没长....觉得是放的时间太长了
请问谁有办法处理一下，帮帮忙！
谢谢

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自信源于一次次成功的积累

1楼 2009-07-04 00:19:34

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anik

银虫 (正式写手)

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★
luckydog52(金币+1,VIP+0): 7-5 00:06

你再划线试试，如果能长得出菌，还有可能，否则。。。。

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2楼2009-07-04 08:01:51

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bbyu007

木虫 (正式写手)

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★
luckydog52(金币+1,VIP+0): 7-5 00:06

划线挑单斑！没问题！

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我是笨笨鱼~~~

3楼2009-07-04 08:41:35

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honghui9251

铜虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0):欢迎交流！ 7-4 10:18
luckydog52(金币+1,VIP+0): 7-5 00:07

带质粒的菌放在液体培养基的不宜放太久
以防质粒重组、缺失、突变
另外，如上面所说，即使重新划线，必须提质粒再测序

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4楼2009-07-04 08:52:50

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zplipeng

金虫 (著名写手)

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★
luckydog52(金币+1,VIP+0): 7-5 00:07

可以拿菌液重新摇菌下。。
如果没有就够呛课

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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~

5楼2009-07-04 09:57:47

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小猫三两只

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★
luckydog52(金币+1,VIP+0): 7-5 00:07

一般菌液放4度不要超过一个月,你可试试直接涂皿或划线培养,不过两个月很有可能菌都死了

6楼2009-07-04 10:05:53

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tingl0087

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★
luckydog52(金币+1,VIP+0): 7-5 00:07

天!同情你!看下还有没有质粒了,着手准备下重新重组和转化吧.

7楼2009-07-04 10:20:39

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luckydog52

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谢谢各位！！
我划线划了2个平板，又涂了2个平板
今晚你培养呢，明天看结果了……

自信源于一次次成功的积累

8楼2009-07-05 00:13:21

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HarveyWang

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

肯定有活菌，LZ 就是要多加抗生素，LB摇一晚，就会长出来的。

放4℃ 菌体也会生长，培养基足够用的。只不过99.999%的活菌体进入静止期了。

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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】

9楼2009-07-05 03:24:20

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yanlili

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

能试试抽质粒吗？即使菌死了，质粒总还在吧，然后再做次转化

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10楼2009-07-05 12:38:11

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