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小x要努力

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何知道一个蛋白在哪个部位表达? 已有2人参与

本科毕设做的是通过某个一系列的同源蛋白筛选特定功能的蛋白质,但是老师后来加了一步,要知道这个蛋白在哪个部位表达,来确定该功能实现的部位在哪。
老师只是说要设计引物然后分析部位。

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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


加荧光蛋白,做融合表达,然后观察荧光定位

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2楼2020-03-30 13:26:20
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

取不同部位的样品,提RNA,进行RT-PCR检测你的目的基因。
3楼2020-04-08 11:44:07
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你要自己知道原理,把你的蛋白带上一个marker(可以荧光信号,也可以是其他可检测的信号),然后分离各组分,检测一下就行了

简单点儿就做个westernblot,带个Flag,his常见的标签,这种抗体也很便宜

RNA其实不建议,新手做的一般都不太好,而且RT-PCR的成本相对比较高
一楼的方法也行,但是你要确保自己有荧光显微镜,还得确保你的样品易观察
Behind the glory is a loneliness
4楼2020-04-09 14:42:45
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