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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 如何知道一个蛋白在哪个部位表达？
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小x要努力

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何知道一个蛋白在哪个部位表达？ 已有2人参与

本科毕设做的是通过某个一系列的同源蛋白筛选特定功能的蛋白质，但是老师后来加了一步，要知道这个蛋白在哪个部位表达，来确定该功能实现的部位在哪。
老师只是说要设计引物然后分析部位。

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1楼 2020-03-28 16:18:06
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
加荧光蛋白，做融合表达，然后观察荧光定位

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2楼2020-03-30 13:26:20
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

取不同部位的样品，提RNA，进行RT-PCR检测你的目的基因。
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3楼2020-04-08 11:44:07
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你要自己知道原理，把你的蛋白带上一个marker（可以荧光信号，也可以是其他可检测的信号），然后分离各组分，检测一下就行了

简单点儿就做个westernblot，带个Flag，his常见的标签，这种抗体也很便宜

RNA其实不建议，新手做的一般都不太好，而且RT-PCR的成本相对比较高
一楼的方法也行，但是你要确保自己有荧光显微镜，还得确保你的样品易观察
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Behind the glory is a loneliness
4楼2020-04-09 14:42:45
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