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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC倒峰怎么办
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wangjun8760

[交流] 【求助】HPLC倒峰怎么办

HPLC 检测，中控过程中在原料和产品之间会出现一个倒峰，空白（流动相）里没有。更换流动相，更换色谱柱都没有改变。

检测波长选择的是原料和产品的最大吸收254nm，但是此倒峰在200~220nm是正峰，由大变小；230nm不见了，240~300nm是倒峰，由小变大。而且此峰可以经过重结晶除掉。由此证明此倒峰是一个杂质。

问题是，我如果选择200~220nm检测，此波长区不是最大吸收，会出现很多其他不必要的杂质；而230nm是原料的最弱吸收区，影响检测结果；240nm后就是倒峰了。

问：是什么原因会出现这样的现象，怎么让它呈正或不出现？
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1楼 2009-07-01 13:03:00
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):有道理 7-1 13:33
本帖仅楼主可见
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2楼2009-07-01 13:21:59
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wangjun8760

引用回帖:
Originally posted by zzbscnu at 2009-7-1 13:21:
紫外检测的原理是样品的吸收与背景（流动相）的吸收的差值，如果样品中某一成分的吸收比流动相的吸收弱，就会出现倒峰

我的检测波长是254nm，流动相是水和乙腈，吸收小于200nm，而此杂质在200~220nm是有吸收的，吸收应该比流动相高吧。
请建议一下，我该怎么做比较好，谢谢啦！
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3楼2009-07-01 13:39:00
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zhoushiyu

新虫 (小有名气)
★
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换流动相试试，或者重新选择吸收波长
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4楼2009-07-01 14:06:58
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xxcl1999

木虫 (正式写手)
请问你溶解样品的溶剂是什么呢？最好用流动相来溶解后再试试进样。
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5楼2009-07-01 14:17:16
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wangjun8760

引用回帖:
Originally posted by xxcl1999 at 2009-7-1 14:17:
请问你溶解样品的溶剂是什么呢？最好用流动相来溶解后再试试进样。

是流动相溶解的样品
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6楼2009-07-01 14:55:32
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wangjun8760

引用回帖:
Originally posted by zhoushiyu at 2009-7-1 14:06:
换流动相试试，或者重新选择吸收波长

这个已经在问题里面说过了
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7楼2009-07-01 14:56:15
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小毛虫8358

金虫 (小有名气)
★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复， 7-2 11:36
不知道LZ用的是什么工作站，如果要把那个负峰改为正峰的话，工作站中有一个翻转的可以调节的。
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8楼2009-07-01 15:25:58
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深蓝2895

木虫 (职业作家)
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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复 7-2 11:37
opq691(金币+0,VIP+0):能否继续关注此贴？ 7-2 16:04
如果你是DAD检测器 可以把参比波长更改一下 比如检测波长和参比波长对换
在设置选项里有的 ，里面还有个时间表的 可以在那里设置不同的时间里检测波长和参比波长对换，
如果你是VWD检测器 在波长设置的MORE/更多--的那个选项里选择---负极性
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我们应该好好活着，因为我们会死很久滴！
9楼2009-07-01 22:42:10
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jiamingw

金虫 (小有名气)
★
chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复 7-2 11:37
中控的时候出现倒峰的问题比较常见，倒峰的出现和许多条件有关系，先考虑一下ph值吧，如果中控的时候ph过酸过碱都有可能出倒峰的。
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10楼2009-07-02 09:07:22
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