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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wangjun8760

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[交流] 【求助】HPLC倒峰怎么办

HPLC 检测,中控过程中在原料和产品之间会出现一个倒峰,空白(流动相)里没有。更换流动相,更换色谱柱都没有改变。

检测波长选择的是原料和产品的最大吸收254nm,但是此倒峰在200~220nm是正峰,由大变小;230nm不见了,240~300nm是倒峰,由小变大。而且此峰可以经过重结晶除掉。由此证明此倒峰是一个杂质。

问题是,我如果选择200~220nm检测,此波长区不是最大吸收,会出现很多其他不必要的杂质;而230nm是原料的最弱吸收区,影响检测结果;240nm后就是倒峰了。

问:是什么原因会出现这样的现象,怎么让它呈正或不出现?
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匿名

实习版主

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chiraler(金币+1,VIP+0):有道理 7-1 13:33
本帖仅楼主可见
2楼2009-07-01 13:21:59
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wangjun8760

专家顾问

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引用回帖:
Originally posted by zzbscnu at 2009-7-1 13:21:
紫外检测的原理是样品的吸收与背景(流动相)的吸收的差值,如果样品中某一成分的吸收比流动相的吸收弱,就会出现倒峰

我的检测波长是254nm,流动相是水和乙腈,吸收小于200nm,而此杂质在200~220nm是有吸收的,吸收应该比流动相高吧。
请建议一下,我该怎么做比较好,谢谢啦!
3楼2009-07-01 13:39:00
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zhoushiyu

专家顾问

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换流动相试试,或者重新选择吸收波长
4楼2009-07-01 14:06:58
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xxcl1999

专家顾问

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请问你溶解样品的溶剂是什么呢?最好用流动相来溶解后再试试进样。
5楼2009-07-01 14:17:16
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wangjun8760

超级版主

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引用回帖:
Originally posted by xxcl1999 at 2009-7-1 14:17:
请问你溶解样品的溶剂是什么呢?最好用流动相来溶解后再试试进样。

是流动相溶解的样品
6楼2009-07-01 14:55:32
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wangjun8760

实习版主

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引用回帖:
Originally posted by zhoushiyu at 2009-7-1 14:06:
换流动相试试,或者重新选择吸收波长

这个已经在问题里面说过了
7楼2009-07-01 14:56:15
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小毛虫8358

版主

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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复, 7-2 11:36
不知道LZ用的是什么工作站,如果要把那个负峰改为正峰的话,工作站中有一个翻转的可以调节的。
8楼2009-07-01 15:25:58
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深蓝2895

实习版主

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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复 7-2 11:37
opq691(金币+0,VIP+0):能否继续关注此贴? 7-2 16:04
如果你是DAD检测器 可以把参比波长更改一下 比如检测波长和参比波长对换
在设置选项里有的 ,里面还有个时间表的 可以在那里设置不同的时间里检测波长和参比波长对换,
如果你是VWD检测器 在波长设置的MORE/更多--的那个选项里选择---负极性
我们应该好好活着,因为我们会死很久滴!
9楼2009-07-01 22:42:10
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jiamingw

兑换贵宾

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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复 7-2 11:37
中控的时候出现倒峰的问题比较常见,倒峰的出现和许多条件有关系,先考虑一下ph值吧,如果中控的时候ph过酸过碱都有可能出倒峰的。
10楼2009-07-02 09:07:22
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