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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC倒峰怎么办
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wangjun8760

[交流] 【求助】HPLC倒峰怎么办

HPLC 检测，中控过程中在原料和产品之间会出现一个倒峰，空白（流动相）里没有。更换流动相，更换色谱柱都没有改变。

检测波长选择的是原料和产品的最大吸收254nm，但是此倒峰在200~220nm是正峰，由大变小；230nm不见了，240~300nm是倒峰，由小变大。而且此峰可以经过重结晶除掉。由此证明此倒峰是一个杂质。

问题是，我如果选择200~220nm检测，此波长区不是最大吸收，会出现很多其他不必要的杂质；而230nm是原料的最弱吸收区，影响检测结果；240nm后就是倒峰了。

问：是什么原因会出现这样的现象，怎么让它呈正或不出现？
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1楼 2009-07-01 13:03:00
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zhoushiyu

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
换流动相试试，或者重新选择吸收波长
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4楼2009-07-01 14:06:58
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匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):有道理 7-1 13:33
本帖仅楼主可见
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2楼2009-07-01 13:21:59
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wangjun8760

引用回帖:
Originally posted by zzbscnu at 2009-7-1 13:21:
紫外检测的原理是样品的吸收与背景（流动相）的吸收的差值，如果样品中某一成分的吸收比流动相的吸收弱，就会出现倒峰

我的检测波长是254nm，流动相是水和乙腈，吸收小于200nm，而此杂质在200~220nm是有吸收的，吸收应该比流动相高吧。
请建议一下，我该怎么做比较好，谢谢啦！
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3楼2009-07-01 13:39:00
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xxcl1999

木虫 (正式写手)
请问你溶解样品的溶剂是什么呢？最好用流动相来溶解后再试试进样。
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5楼2009-07-01 14:17:16
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