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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 枯草发酵中试染菌
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刘夫子

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草发酵中试染菌 已有3人参与

做枯草芽孢杆菌中试，小试已验证没有问题，10L发酵罐芽孢120亿左右，2000L中试总是染菌，菌落形态明显不同，每次都在10时开始出现杂菌，12h以后全是杂菌，显微镜看细菌很长，比正常枯草要长5倍以上，，有时候会出现头发丝一样的菌，成团，16s无法鉴定，后期能形成芽孢，发酵罐更换空气滤芯无效，使用的是四氟乙烯材质的滤芯，发酵罐使用时间接近十年，现在怀疑是发酵罐或空气系统问题，请高人指点解决染菌问题！

@天使托 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2020-03-04 14:03:56
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懒蛋皮皮虾

新虫 (初入文坛)
怀疑罐子就空培一天一夜，没事在接种。怀疑空气系统就空消自己更换滤芯，消滤芯时找有经验的发酵员操作，注意细节。另外考虑物料是否彻底灭菌。

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2楼2020-03-04 21:21:18
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百仑Bio

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有很多种可能，第一更换滤芯，气源需要处理，还有一种可能就是罐体和夹套有漏点。希望能帮到你。
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上海百仑生物生物科技有限公司，闫聪，电话：18721723617，QQ2753493402，买发酵罐找我就对啦、主营：玻璃发酵罐、不锈钢发酵罐、细胞生物反应器、气升式发酵罐
3楼2020-03-05 10:30:58
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2000L的罐子接种量多少？空气增加预过滤器，接种量适度增加，分时取罐内样，无菌培养，镜检观察。
应该多是空气原因，改变采气口的环境，干燥、洁净点的
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4楼2020-03-05 19:52:17
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

你这个也不一定是染菌！大肠发酵丝状物不是很常见么。
保险起见更换空气滤芯，检查管道死角也是必要的！
你说后期还是大量形成芽孢，放罐以后，回接到培养基看看有几种菌落形态，如果和原来一致就不必理会。
另外，你发酵是为了测酶活还是单纯收集菌体？根据你的目的，检测一下是否有活性损失？再诊断。
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生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
5楼2020-03-07 17:07:35
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怪兽爱萝莉

新虫 (初入文坛)
16s没法鉴定出结果？可以到我们这边做下菌种鉴定。我们是梅里埃，做微生物鉴定还是很专业的。
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6楼2020-03-25 10:17:27
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hpfcmw

新虫 (正式写手)
你可以空培一天试试看看会不会染菌，这玩意因素挺多的

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7楼2020-07-17 16:20:39
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南京天汇

银虫 (正式写手)
★ ★
小冀-: 金币+2, 鼓励回帖交流 2020-07-21 10:03:05
1.检查密封性，打压到0.2MPA用肥皂水试漏
2.更换空气滤芯
3.罐内加水，夹套打压0.2MPA看有气泡
4.PH,DO护套更换重新安装
5.空气分布环用水冲洗
6.上LB灭菌30分钟空白培养一天
7.还是有问题可以问我
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8楼2020-07-20 12:02:45
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莫拉蒂

新虫 (小有名气)
我的天

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9楼2020-08-06 23:07:47
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轩若伊

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 如来神掌 at 2020-03-07 17:07:35
你这个也不一定是染菌！大肠发酵丝状物不是很常见么。
保险起见更换空气滤芯，检查管道死角也是必要的！
你说后期还是大量形成芽孢，放罐以后，回接到培养基看看有几种菌落形态，如果和原来一致就不必理会。
另外 ...

有道理 我们在做枯草发酵产芽孢过程中在两天是镜检里边看到丝状成列的细胞 感觉像是芽孢形成过程中出现的菌体形态 不是染杂菌的
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10楼2026-06-10 21:36:14
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