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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 枯草发酵中试染菌
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刘夫子

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草发酵中试染菌 已有3人参与

做枯草芽孢杆菌中试，小试已验证没有问题，10L发酵罐芽孢120亿左右，2000L中试总是染菌，菌落形态明显不同，每次都在10时开始出现杂菌，12h以后全是杂菌，显微镜看细菌很长，比正常枯草要长5倍以上，，有时候会出现头发丝一样的菌，成团，16s无法鉴定，后期能形成芽孢，发酵罐更换空气滤芯无效，使用的是四氟乙烯材质的滤芯，发酵罐使用时间接近十年，现在怀疑是发酵罐或空气系统问题，请高人指点解决染菌问题！

@天使托 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2020-03-04 14:03:56
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懒蛋皮皮虾

新虫 (初入文坛)
怀疑罐子就空培一天一夜，没事在接种。怀疑空气系统就空消自己更换滤芯，消滤芯时找有经验的发酵员操作，注意细节。另外考虑物料是否彻底灭菌。

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2楼2020-03-04 21:21:18
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百仑Bio

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有很多种可能，第一更换滤芯，气源需要处理，还有一种可能就是罐体和夹套有漏点。希望能帮到你。
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上海百仑生物生物科技有限公司，闫聪，电话：18721723617，QQ2753493402，买发酵罐找我就对啦、主营：玻璃发酵罐、不锈钢发酵罐、细胞生物反应器、气升式发酵罐
3楼2020-03-05 10:30:58
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2000L的罐子接种量多少？空气增加预过滤器，接种量适度增加，分时取罐内样，无菌培养，镜检观察。
应该多是空气原因，改变采气口的环境，干燥、洁净点的
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4楼2020-03-05 19:52:17
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

你这个也不一定是染菌！大肠发酵丝状物不是很常见么。
保险起见更换空气滤芯，检查管道死角也是必要的！
你说后期还是大量形成芽孢，放罐以后，回接到培养基看看有几种菌落形态，如果和原来一致就不必理会。
另外，你发酵是为了测酶活还是单纯收集菌体？根据你的目的，检测一下是否有活性损失？再诊断。
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生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
5楼2020-03-07 17:07:35
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怪兽爱萝莉

新虫 (初入文坛)
16s没法鉴定出结果？可以到我们这边做下菌种鉴定。我们是梅里埃，做微生物鉴定还是很专业的。
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6楼2020-03-25 10:17:27
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hpfcmw

新虫 (正式写手)
你可以空培一天试试看看会不会染菌，这玩意因素挺多的

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7楼2020-07-17 16:20:39
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南京天汇

银虫 (正式写手)
★ ★
小冀-: 金币+2, 鼓励回帖交流 2020-07-21 10:03:05
1.检查密封性，打压到0.2MPA用肥皂水试漏
2.更换空气滤芯
3.罐内加水，夹套打压0.2MPA看有气泡
4.PH,DO护套更换重新安装
5.空气分布环用水冲洗
6.上LB灭菌30分钟空白培养一天
7.还是有问题可以问我
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8楼2020-07-20 12:02:45
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莫拉蒂

新虫 (小有名气)
我的天

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9楼2020-08-06 23:07:47
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