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刘夫子

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草发酵中试染菌 已有3人参与

做枯草芽孢杆菌中试,小试已验证没有问题,10L发酵罐芽孢120亿左右,2000L中试总是染菌,菌落形态明显不同,每次都在10时开始出现杂菌,12h以后全是杂菌,显微镜看细菌很长,比正常枯草要长5倍以上,,有时候会出现头发丝一样的菌,成团,16s无法鉴定,后期能形成芽孢,发酵罐更换空气滤芯无效,使用的是四氟乙烯材质的滤芯,发酵罐使用时间接近十年,现在怀疑是发酵罐或空气系统问题,请高人指点解决染菌问题!

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懒蛋皮皮虾

新虫 (初入文坛)

怀疑罐子就空培一天一夜,没事在接种。怀疑空气系统就空消自己更换滤芯,消滤芯时找有经验的发酵员操作,注意细节。另外考虑物料是否彻底灭菌。

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2楼2020-03-04 21:21:18
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百仑Bio

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有很多种可能,第一更换滤芯,气源需要处理,还有一种可能就是罐体和夹套有漏点。希望能帮到你。
上海百仑生物生物科技有限公司,闫聪,电话:18721723617,QQ2753493402,买发酵罐找我就对啦、主营:玻璃发酵罐、不锈钢发酵罐、细胞生物反应器、气升式发酵罐
3楼2020-03-05 10:30:58
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
2000L的罐子接种量多少?空气增加预过滤器,接种量适度增加,分时取罐内样,无菌培养,镜检观察。
应该多是空气原因,改变采气口的环境,干燥、洁净点的
4楼2020-03-05 19:52:17
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

你这个也不一定是染菌!大肠发酵丝状物不是很常见么。
保险起见更换空气滤芯,检查管道死角也是必要的!
你说后期还是大量形成芽孢,放罐以后,回接到培养基看看有几种菌落形态,如果和原来一致就不必理会。
另外,你发酵是为了测酶活还是单纯收集菌体?根据你的目的,检测一下是否有活性损失?再诊断。
生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
5楼2020-03-07 17:07:35
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怪兽爱萝莉

新虫 (初入文坛)

16s没法鉴定出结果?可以到我们这边做下菌种鉴定。我们是梅里埃,做微生物鉴定还是很专业的。
6楼2020-03-25 10:17:27
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hpfcmw

新虫 (正式写手)

你可以空培一天试试看看会不会染菌,这玩意因素挺多的

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7楼2020-07-17 16:20:39
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南京天汇

银虫 (正式写手)


★ ★
小冀-: 金币+2, 鼓励回帖交流 2020-07-21 10:03:05
1.检查密封性,打压到0.2MPA用肥皂水试漏
2.更换空气滤芯
3.罐内加水,夹套打压0.2MPA看有气泡
4.PH,DO护套更换重新安装
5.空气分布环用水冲洗
6.上LB灭菌30分钟空白培养一天
7.还是有问题可以问我
8楼2020-07-20 12:02:45
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莫拉蒂

新虫 (小有名气)

9楼2020-08-06 23:07:47
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