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czbd2016

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA聚合酶能否满足序列测定检测突变 已有2人参与

近期打算做基因的序列测定检测突变，目的片断大小356bp,因为目的片断不是很大,请问需要用高保真的DNA聚合酶，还是用普通的TAQ酶就够了,希望有经验的给个意见！谢谢！
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1楼 2020-03-04 09:19:42
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以在Taq里混合少量pfu，即Taq plus。
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核酸提取与Taqman诊断
3楼2020-03-06 09:18:31
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)
建议用高保真的DNA聚合酶，因为是检测突变的实验，如果用普通的TAQ酶，扩增的片断很容易引起突变，以前用普通的TAQ酶后导致我的目的片断发生突变，换用BIODAI高保真的DNA聚合酶后没问题，高保真的DNA聚合酶具有5‘-3’DNA聚合酶的活性和3‘-5’的外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。它主要用于基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析和末端补平等实验中。
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2楼2020-03-04 14:44:29
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JAYWEN书生

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Proofast™ Super-Fidelity DNA Polymerase
还不错，我师姐在Science Advances发的文章就用这个。DOI: 10.1126/sciadv.aaw8451
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4楼2020-03-11 15:09:15
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