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czbd2016

铜虫 (小有名气)


[交流] 有关痰液DNA提取纯化

想请教一下,痰液DNA提取过程中如何纯化?在痰液提取实验前,如果样本痰液时的粘稠状,应该如何处理?
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


纯化常用柱层析法和氯化铯梯度离心法。常使用的所有纯化方法都利用了质粒DNA 相对较小及共价闭合环状这样两个性质。柱层析法常使用的也就是BIODAI,对于痰液样本的处理,向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH,室温放置30分钟,每10分钟振荡混匀一次(如痰液仍粘稠,可适当延长液化时间),12,000 rpm离心5 min,弃上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀15秒。
5楼2020-02-28 16:26:28
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艾柏森生物

铁虫 (小有名气)



czbd2016(金币+1): 谢谢参与
顶上去
7楼2020-03-02 08:58:11
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


染料法与探针法的引物可以通用,但是前体是你对PCR体系进行优化,使在保证灵敏度比改变的情况下引物浓度尽量的少。因为染料法对引物二聚体也有荧光信号,以上操作是你要保证引物二聚体尽量少。另外染料法需要做溶解曲线,如果溶解曲线主峰前面的线比较平滑没什么杂峰,说明引物没问题。在曲线这块BIOG和ROCHE还是很典型的。
9楼2020-03-03 17:02:29
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以参考purimag给的鼻咽拭子方法 http://www.purimagbead.com/html/1059643037.html
10楼2020-05-08 22:52:45
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tzynew2楼
2020-02-28 09:39   回复  
czbd2016(金币+1): 谢谢参与
8 发自小木虫Android客户端
nono20093楼
2020-02-28 12:44   回复  
czbd2016(金币+1): 谢谢参与
·
nono20094楼
2020-02-28 12:44   回复  
·
2020-02-29 17:29   回复  
czbd2016(金币+1): 谢谢参与
2020-03-02 15:20   回复  
czbd2016(金币+1): 谢谢参与
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