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wkj1015

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助:纤维素酶活测定的问题已有3人参与

本人利用实验室从酱香大曲中筛选的5株耐高温放线菌测定纤维素酶活,所用培养基:CMC-Na 10g,(NH4)2SO4 4g,Na2HPO4·12H2O4.2g, KH2PO41.4g,  FeSO4·7H2O 0.016g,MgSO4·7H2O 0.5g,蛋白胨3g,酵母浸出物0.162g,蒸馏水1000ml。从斜面上直接挑取少量菌种接种至100ML液体培养基中,在50℃,180r/min条件下,振荡培养3d,经观察,三角瓶中培养基均有大量菌丝体产生,且有两瓶已经浑浊,直接吸取1ml培养液,50℃水浴活化5min后加入4ml0.625%CMC-Na溶液(用PH4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液配制,提前也在50℃水浴活化过)在50℃水浴1小时后,立即加入1ml2mol/LNaOH溶液和2mlDNS溶液,在沸水浴中处理5min后用冷水冷却后未变色,与空白样的颜色一致,测不出酶活。反复多次都是不可以。不知道是什么问题?求助。困惑的是观察以CMC-Na为唯一碳源培养后菌株是生产的,而且长的还不错,但是就测不出酶活。有高人能帮忙吗?
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TerryHLHL

铜虫 (小有名气)

请问楼主解决了吗?我也碰到了一样的问题!

发自小木虫IOS客户端
6楼2021-01-29 04:12:07
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