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wkj1015铜虫 (初入文坛)
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[求助]
求助：纤维素酶活测定的问题 已有3人参与
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| 本人利用实验室从酱香大曲中筛选的5株耐高温放线菌测定纤维素酶活，所用培养基：CMC-Na 10g，(NH4)2SO4 4g，Na2HPO4·12H2O4.2g， KH2PO41.4g， FeSO4·7H2O 0.016g，MgSO4·7H2O 0.5g，蛋白胨3g，酵母浸出物0.162g，蒸馏水1000ml。从斜面上直接挑取少量菌种接种至100ML液体培养基中，在50℃，180r/min条件下，振荡培养3d，经观察，三角瓶中培养基均有大量菌丝体产生，且有两瓶已经浑浊，直接吸取1ml培养液，50℃水浴活化5min后加入4ml0.625%CMC-Na溶液（用PH4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液配制，提前也在50℃水浴活化过）在50℃水浴1小时后，立即加入1ml2mol/LNaOH溶液和2mlDNS溶液，在沸水浴中处理5min后用冷水冷却后未变色，与空白样的颜色一致，测不出酶活。反复多次都是不可以。不知道是什么问题？求助。困惑的是观察以CMC-Na为唯一碳源培养后菌株是生产的，而且长的还不错，但是就测不出酶活。有高人能帮忙吗？ |
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