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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)

[求助] 启动子克隆 已有1人参与

大家好,我这里有个物种的转录组数据,但是该物种的基因组数据还没有人测序,我想利用转录组数据研究某个关键基因的启动子,所以,想请问一下,这个启动子的序列,我该用什么方法得到??
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薛小敏那

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by longanzz at 2020-03-08 22:35:55
你需要拿到你基因的基因组序列,然后设计引物做chromosome walking,self-adaptor pcr,热不对称pcr。有些基因有内含子,不能直接以cDNA来做,

您好,怎么知道基因是否只含内含子呢,克隆全基因组的话怎么设计引物呢

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6楼2020-12-24 12:28:09
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zhaopincang

木虫 (小有名气)

chromosome walking,self-adaptor pcr,热不对称pcr,原理就是根据已知序列进行侧翼序列的扩增,有的公司有成型的试剂盒。

发自小木虫Android客户端
务实,付出
2楼2020-02-13 19:56:29
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaopincang at 2020-02-13 19:56:29
chromosome walking,self-adaptor pcr,热不对称pcr,原理就是根据已知序列进行侧翼序列的扩增,有的公司有成型的试剂盒。

你好,还想问一下,染色体步移和5‘race,3’race有什么区别呢
3楼2020-02-13 22:34:47
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaopincang at 2020-02-13 19:56:29
chromosome walking,self-adaptor pcr,热不对称pcr,原理就是根据已知序列进行侧翼序列的扩增,有的公司有成型的试剂盒。

还想问一下,用这个方法是不是也可以得到整个基因的全长??
4楼2020-02-13 22:40:13
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