24小时热门版块排行榜    

查看: 673  |  回复: 1

卷卷康小西

银虫 (小有名气)

[求助] 酶活测试求助 已有1人参与

请问有了解酶偶联反应法的小伙伴吗?
测目标酶活的时候需要加入工具酶辅助耦联,但是,请问怎么样才能保证多次试验中工具酶活性的一致性呢?
没有购买商品酶,这个工具酶每次都是现用现养菌提的,用之前会测有没有活性。这样的话多次测目标酶活的时候,没有办法保证工具酶的活性都是一致的,有小伙伴有类似的经验吗?求大神指点!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
卷卷康小西: 金币+20, ★★★很有帮助 2020-02-28 22:09:33
1:能把蛋白纯化出来后冷冻分装吗?这样可以每次加入相同的酶,保证实验的可重复性

2:偶联测蛋白活性,一般都是把辅助反应设为过量(即过量的酶,过量的底物),保证要测的酶的活性不受到辅助酶反应的影响

例如: ATP-NADH 经常用于ATP消耗系统的实验,ATP,磷酸烯醇式丙酮酸,NADH及PK/LDH酶加入,保证消耗的ATP能迅速被再生,PK/LDH酶在过量的情况下,多加少加对实验的影响是有限的。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2020-02-24 11:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 卷卷康小西 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求调剂 +7 chuanzhu川烛 2026-03-18 7/350 2026-03-23 09:22 by king123!
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 0854电子信息求调剂 +3 α____ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:28 by zhq0425
[考研] 307求调剂 +11 冷笙123 2026-03-17 11/550 2026-03-22 20:16 by edmund7
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 环境学硕288求调剂 +6 皮皮皮123456 2026-03-22 6/300 2026-03-22 16:52 by i_cooler
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
信息提示
请填处理意见