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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] 如何获得基因组中目的基因的上游基因

拿到了一个基因后发现这个基因的上游序列可能缺失,现在想获得上游基因,是叫染色体步移吗?
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闹太套
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

2楼2009-06-25 15:39:49
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

可以用IPCR和Southern blot 结合起来作.当然你说得genome walking 也是可以的.

RACE我没有做过,o(∩_∩)o...
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2009-06-25 15:48:14
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lynn5180

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
三种方法
1 race要拿cDNA做
2 TAIL要求不高基因组就可以但是重复性不好
3找文库 然后拿已知序列设计引物做PCR拿到阳性后对其测序
4楼2009-06-25 15:52:25
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
基因组步行,LA PCR in vitro cloning kit
5楼2009-06-25 15:52:35
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anik

银虫 (正式写手)

5‘RACE
6楼2009-06-25 17:09:11
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你收索一下SEFA-PCR吧,我们实验室的方法,AEM上的文章
帮助虫友,提升自己
7楼2009-06-25 21:27:36
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wenjuan

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by charon1982 at 2009-6-25 21:27:
你收索一下SEFA-PCR吧,我们实验室的方法,AEM上的文章

我前一段时间做过一次SEFA-PCR,但没做出来,大侠给指点一下吧
8楼2009-06-26 13:21:29
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

引物设计的问题?
帮助虫友,提升自己
9楼2009-06-28 12:10:47
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wenjuan

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by charon1982 at 2009-6-28 12:10:
引物设计的问题?

最主要的应该是那条非特异性引物SP3吧?我是按你们的文献上说的设计的,中间的兼并碱基有8个N,不知道有没有问题?还有就是PCR循环条件大侠能不能给说的详细点,文献上看的不是特别明白,呵呵。
10楼2009-06-30 10:01:27
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