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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何获得基因组中目的基因的上游基因
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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] 如何获得基因组中目的基因的上游基因

拿到了一个基因后发现这个基因的上游序列可能缺失，现在想获得上游基因，是叫染色体步移吗？
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闹太套
1楼 2009-06-25 15:17:45
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wenjuan

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
Originally posted by charon1982 at 2009-6-28 12:10:
引物设计的问题？

最主要的应该是那条非特异性引物SP3吧？我是按你们的文献上说的设计的，中间的兼并碱基有8个N，不知道有没有问题？还有就是PCR循环条件大侠能不能给说的详细点，文献上看的不是特别明白，呵呵。
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10楼2009-06-30 10:01:27
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
可以用IPCR和Southern blot 结合起来作.当然你说得genome walking 也是可以的.

RACE我没有做过,o(∩_∩)o...
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2009-06-25 15:48:14
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lynn5180

铜虫 (初入文坛)
★
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三种方法
1 race要拿cDNA做
2 TAIL要求不高基因组就可以但是重复性不好
3找文库 然后拿已知序列设计引物做PCR拿到阳性后对其测序
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4楼2009-06-25 15:52:25
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
基因组步行，LA PCR in vitro cloning kit
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5楼2009-06-25 15:52:35
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