24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 828  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

[交流] 求助分开130kd和138kd蛋白的SDS蛋白胶浓度.

如题,我有一个蛋白预计大小138kd,但是表达量不高,跑10%sds时没有目的条带,怀疑和大肠杆菌自身130左右的蛋白跑在一起,现在想重新跑胶.要将130左右的蛋白分开,分离胶浓度应该是多少?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


jqq1985(金币+1,VIP+0):谢谢 6-25 11:06
明确告诉LZ:分不开。

哈哈哈哈哈哈哈。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-06-25 09:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

这个比较困难了,o(∩_∩)o...,可以纯化下再跑.
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2009-06-25 09:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aaaaaa1380

至尊木虫 (知名作家)


jqq1985(金币+1,VIP+0):谢谢 6-25 11:07
你可以试试11%或者10.5%SDS PAGE,12%的胶本实验室正在用,对于20-45KDa的蛋白质有较好的分辨率,根据你给的10%SDS胶分不开的结果,建议你用上述的浓度试试。
对于你表达的蛋白质浓度很低,建议你用银染,或者免疫亲和的方法富集一下你的样品,强烈推荐你用免疫共沉淀方法提取你想要的目的蛋白。

祝实验顺利
4楼2009-06-25 10:27:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

表达量低到这种程度往下做就很困难了
5楼2009-06-25 10:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见