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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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huangting1280

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】下面溶液该如何配制

HPLC流动相:乙腈、水(40∶60) ,乙酸4 %如何配置,PH值如何测
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zhouman

铁虫 (小有名气)

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opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版,why有机含量太高蛋白会沉淀的?我想学习一下 6-27 14:46
引用回帖:
Originally posted by zhaojunji06 at 2009-6-25 10:02:
你是做蛋白检测吧?
HPLC流动相:乙腈、水(40∶60) ,乙酸4 %配置:
先将水过滤,如果你准备配制1000ml的话,取乙腈400ml,加入500ml过滤的超纯水,再加入40ml的乙酸,用过滤的超纯水定容至1000ml即可.无须测定PH值.

...

做蛋白检测时 有机含量不能太高吧 一般在15%-35% 太高蛋白会沉淀的
6楼2009-06-27 12:50:14
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shilywzz

金虫 (小有名气)

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看你走不走梯度了。
等度,把乙酸加到水里,按照乙腈40 ,第二相水56 乙酸4 比例添加。
如果梯度,为了保证pH恒定,注意乙酸的量恒定。
有两种方法:
1.三相,把乙酸配成浓度稍大些的溶液,在梯度表里要保证这一相比例不变。
2.把乙酸分别加到乙腈及水中,均是4%。走梯度无论什么时候都是乙酸4%。

测pH,当然要用自动pH计,试纸没戏
2楼2009-06-25 09:50:21
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kingliyanfei

金虫 (小有名气)

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按我的理解话,是不是先配乙腈:水=40:60,如配成1000ml,加乙酸40ml?我只是把4%按体积想了,不过如果这样,我怎么觉得酸是不是有点多了,不怎么合理

用ph计测ph
3楼2009-06-25 09:56:53
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zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

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你是做蛋白检测吧?
HPLC流动相:乙腈、水(40∶60) ,乙酸4 %配置:
先将水过滤,如果你准备配制1000ml的话,取乙腈400ml,加入500ml过滤的超纯水,再加入40ml的乙酸,用过滤的超纯水定容至1000ml即可.无须测定PH值.

如果你是做蛋白检测的话,建议采用乙腈、水(40∶60) ,0.1 %三氟乙酸作为流动相.
4楼2009-06-25 10:02:01
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