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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】下面溶液该如何配制
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huangting1280

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】下面溶液该如何配制

HPLC流动相:乙腈、水(40∶60) ,乙酸4 %如何配置，PH值如何测
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1楼 2009-06-24 20:17:14
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shilywzz

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看你走不走梯度了。
等度，把乙酸加到水里，按照乙腈40 ，第二相水56 乙酸4 比例添加。
如果梯度，为了保证pH恒定，注意乙酸的量恒定。
有两种方法：
1.三相，把乙酸配成浓度稍大些的溶液，在梯度表里要保证这一相比例不变。
2.把乙酸分别加到乙腈及水中，均是4%。走梯度无论什么时候都是乙酸4%。

测pH，当然要用自动pH计，试纸没戏
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2楼2009-06-25 09:50:21
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kingliyanfei

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按我的理解话，是不是先配乙腈：水=40：60，如配成1000ml，加乙酸40ml？我只是把4%按体积想了，不过如果这样，我怎么觉得酸是不是有点多了，不怎么合理

用ph计测ph
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3楼2009-06-25 09:56:53
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zhaojunji06

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你是做蛋白检测吧?
HPLC流动相:乙腈、水(40∶60) ,乙酸4 %配置:
先将水过滤,如果你准备配制1000ml的话,取乙腈400ml,加入500ml过滤的超纯水,再加入40ml的乙酸,用过滤的超纯水定容至1000ml即可.无须测定PH值.

如果你是做蛋白检测的话,建议采用乙腈、水(40∶60) ,0.1 %三氟乙酸作为流动相.
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4楼2009-06-25 10:02:01
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
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乙腈-水（40：60）指的是体积比，4%的醋酸应该是指流动相体积的4%。4%体积好像是有点多了，我们做，一般是0.2%或0.4%的比例
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药物合成
5楼2009-06-25 13:27:10
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zhouman

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opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流，欢迎常来分析版,why有机含量太高蛋白会沉淀的?我想学习一下 6-27 14:46
引用回帖:
Originally posted by zhaojunji06 at 2009-6-25 10:02:
你是做蛋白检测吧?
HPLC流动相:乙腈、水(40∶60) ,乙酸4 %配置:
先将水过滤,如果你准备配制1000ml的话,取乙腈400ml,加入500ml过滤的超纯水,再加入40ml的乙酸,用过滤的超纯水定容至1000ml即可.无须测定PH值.

...

做蛋白检测时 有机含量不能太高吧 一般在15％－35％ 太高蛋白会沉淀的
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6楼2009-06-27 12:50:14
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