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chongzi8107

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】乙腈的紫外吸收波长问题

我做HPLC用的是水和乙腈,比例是95:5,设定波长是196nm。出现了好多问题,首先作了一下乙腈的吸收,发现吸收很大;另外一个是每次做的谱图都不一样,差别大;基线噪音大;有的峰特别宽。到底是怎么回事?
用的是紫外检测器。
请大家帮帮我啊。

[ Last edited by chiraler on 2009-6-23 at 20:43 ]
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嘉木

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
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jsys(金币+2,VIP+0):感谢参与! 6-23 20:23
乙腈在196的吸收很大的啊
噪音大很正常,一般都是选择大于220的波长
2楼2009-06-23 20:10:16
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cez_life

新虫 (初入文坛)

★ ★
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jsys(金币+1,VIP+0):感谢参与! 6-23 20:23
甲醇和乙腈作流动相时,一般波长到应该大于220nm的
好好学习 天天向上 哦耶!
3楼2009-06-23 20:17:55
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zijing_988

银虫 (小有名气)


opq691(金币+1):谢谢回帖交流
5%的乙腈很难平衡,最好先用大比例的乙腈先冲一会,

以前一个项目,用到50%的 乙腈,210nm

很好平衡,都很好!乙腈190nm处末端吸收比较大

[ Last edited by zijing_988 on 2009-6-24 at 07:20 ]
4楼2009-06-23 22:05:40
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yjywei

木虫 (著名写手)

★ ★
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opq691(金币+1):谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 嘉木 at 2009-6-23 20:10:
乙腈在196的吸收很大的啊
噪音大很正常,一般都是选择大于220的波长

乙腈在196nm还可以勉强使用的,它的截止波长大约在190nm,甲醇的高点,202nm

少比例的有机溶剂会难平衡点,基线难免有波动,特别是保留时间,没有平衡好会变化很大   
尽量多平衡

峰宽有很多原因的,主要是流动相的原因。不知道保留时间 ,流速,是多少。和可以传几张图来。那样更便于分析
5楼2009-06-24 06:09:57
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chongzi8107

银虫 (小有名气)

谢谢

谢谢大家。
流速是1mL/min
可是图怎么传啊
6楼2009-06-25 18:49:16
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xiaoxie416

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+2):感谢参与交流,欢迎常来分析版
乙腈的紫外吸收在210nm,楼主检测时的吸收波长不应低于这个数值。HPLC用的是水和乙腈,比例是95:5,有机相的比例较低的话导致柱子平衡效果不好,基线不稳,如果在做液相时采用的是二元泵,可以改用一元泵试试,配置5%的乙腈的水溶液单泵洗脱效果可能好些,同时在进样前一定要将柱子平衡好。
7楼2009-06-26 14:25:15
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longquan8297

铁杆木虫 (著名写手)

木虫的称号也得到了。为什么 ...


opq691(金币+1):感谢参与交流,欢迎常来分析版
我看你紫外设定的波长不好!
流氓不可怕,就怕流氓没文化~~
8楼2009-06-26 16:02:42
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lixin3369

禁虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


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opq691(金币+0):请最好不要再次灌水,希望参与讨论,下次灌水要罚币币哦
领个红包
9楼2009-06-26 16:03:12
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monitor2885

至尊木虫 (知名作家)

队长

波长太低了,高一些吧
Retirement
10楼2009-06-27 09:42:40
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