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caiqingchong木虫 (著名写手)
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[交流]
请帮忙计算酶活
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如果这样一道题目： 1ml总反应体积中，有10ul的酶（13ug），在2min内的吸光度变化为0.22，摩尔消光系数是12mM-1CM-1（-1为上标），光径是1cm ，定义酶活单位为每分钟生成1umol产物需要的酶量为一个酶活单位 。试计算该酶的酶活力！ 麻烦哪位老虫把具体步骤写清楚，顺便带上单位吧，拜托了，越详细越好！ [ Last edited by caiqingchong on 2009-6-20 at 10:50 ] |
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350784478(金币+3,VIP+0):谢谢参与，很详细。 6-20 20:57
caiqingchong(金币+3,VIP+0):太感谢了，太详细了，只是发的奖金太少了，不能追加吧！ 6-21 15:36
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caiqingchong(金币+3,VIP+0):太感谢了，太详细了，只是发的奖金太少了，不能追加吧！ 6-21 15:36
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研究中所用到的酶比活的计算公式： 其单位为μmol/(mg Protein·min)（你自己根据定义推导吧）。 其中， 本项工作中1000 μL 为反应体积。 ΔA 为在测定时间Δt（min）内反应系统在测定波长的吸光值的变化； VE 为测定的酶液加入的体积 （μL）； ε（μM） 为所用的底物的微摩尔消光系数，可由底物的标准曲线求出。例如NADPH或NADH 在340 nm 的毫摩尔消光系数为6.22 mM-1·cm-1，其微摩尔消光系数即0.00622μM-1· m-1，其意义即在1 cm 的光路中1.0 μmol/L 浓度 NADPH 或NADH 其在340 nm的吸光值为0.00622。 CPr 为酶液的蛋白浓度（g/L ） 你的酶活即=[(0.22/2min)*(1/0.012)] / (1.3*10uL/1000) 0.012为其微摩尔消光系数 1.3g/L为其蛋白浓度，测得的， 10uL为加酶液的体积。 [ Last edited by HarveyWang on 2009-6-20 at 20:05 ] |
5楼2009-06-20 19:51:22
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3楼2009-06-20 18:55:09
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