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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请帮忙计算酶活
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caiqingchong

木虫 (著名写手)

[交流] 请帮忙计算酶活

如果这样一道题目：

1ml总反应体积中，有10ul的酶（13ug），在2min内的吸光度变化为0.22，摩尔消光系数是12mM-1CM-1（-1为上标），光径是1cm ，定义酶活单位为每分钟生成1umol产物需要的酶量为一个酶活单位 。试计算该酶的酶活力！

麻烦哪位老虫把具体步骤写清楚，顺便带上单位吧，拜托了，越详细越好！

[ Last edited by caiqingchong on 2009-6-20 at 10:50 ]
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1楼2009-06-20 10:30:49
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caiqingchong

木虫 (著名写手)
这么常用的方法很多虫子都用过吧，只是我现在有些糊涂了！
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2楼2009-06-20 13:16:29
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caiqingchong

木虫 (著名写手)
嫌钱少了吗，没人回答？
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3楼2009-06-20 18:55:09
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HarveyWang

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海外行者
★ ★ ★
caiqingchong(金币+3,VIP+0): 6-21 15:35
我会哇，等我吃饭回来给你详细滴公式，这可是写在我的博士论文里的哇。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-06-20 19:04:05
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★ ★ ★ ★ ★
350784478(金币+3,VIP+0):谢谢参与，很详细。 6-20 20:57
caiqingchong(金币+3,VIP+0):太感谢了，太详细了，只是发的奖金太少了，不能追加吧！ 6-21 15:36
研究中所用到的酶比活的计算公式：


其单位为μmol/(mg Protein·min)（你自己根据定义推导吧）。
其中，
本项工作中1000 μL 为反应体积。

ΔA 为在测定时间Δt（min）内反应系统在测定波长的吸光值的变化；

VE 为测定的酶液加入的体积 （μL）；

ε（μM） 为所用的底物的微摩尔消光系数，可由底物的标准曲线求出。例如NADPH或NADH 在340 nm 的毫摩尔消光系数为6.22 mM-1·cm-1，其微摩尔消光系数即0.00622μM-1· m-1，其意义即在1 cm 的光路中1.0 μmol/L 浓度  NADPH 或NADH 其在340 nm的吸光值为0.00622。

CPr 为酶液的蛋白浓度（g/L ）


你的酶活即=[(0.22/2min)*(1/0.012)]  /  (1.3*10uL/1000)

0.012为其微摩尔消光系数
1.3g/L为其蛋白浓度，测得的，
10uL为加酶液的体积。

[ Last edited by HarveyWang on 2009-6-20 at 20:05 ]
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-06-20 19:51:22
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白熬乐之

木虫 (正式写手)
楼上的写的很详细啊，呵呵。
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6楼2009-06-20 20:46:35
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