24小时热门版块排行榜    

查看: 1355  |  回复: 14
当前主题已经存档。

zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】色谱基线出现锯齿状,该怎么办?

最近在采用凝胶色谱检测生物大分子时,遇到一个非常棘手的问题,不知道该如何解决,希望各位高手能指点迷津、帮忙解决,不胜感激!

具体问题:
凝胶色谱柱:WATERS WAT011535(ultrahydrogelTM 1000,7.8X300mm)
流动相:10mM PB(pH 8.4)
流速:0.3ml/min
待检样品:多糖(分子量300KD)
温度:30

现象:
在流速0.3ml/min时平衡柱子时,基线很难平衡(非锯齿状),于是将流速调至0.5ml/min,基线快速达到平稳,于是再将流速调回到0.3ml/min是,基线出现锯齿状、波动及大,平衡很久,基线仍然无法平直。这会是什么问题,该如何解决啊?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jane291

金虫 (小有名气)

★ ★
wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢 6-20 17:39
zhaojunji06(金币+1,VIP+0): 6-24 13:41
不知楼主机器上的锯齿状基线有没有规律啊?比如说每两分钟走一个之类的,估计是进气泡了,在废液口抽一下吧~~~
2楼2009-06-20 12:12:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuke009

铁杆木虫 (著名写手)


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢 6-20 17:40
可能是进气泡了,冲洗一下看看行不行
如果还不行,就打电话给仪器工程师处理吧
3楼2009-06-20 13:05:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjywei

木虫 (著名写手)


wingcat(金币+1):谢谢
锯齿状波动多大mv?一般噪声为0.002mv  在高10倍也算正常
4楼2009-06-20 13:56:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunli0808


jsys(金币+1,VIP+0):感谢参与! 6-21 10:37
可能进气跑了。引起基线不稳
5楼2009-06-20 13:59:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜

★ ★
wingcat(金币+2):谢谢
这个问题是只出现了今天这一次呢,还是每天你都是这个程序,每天都这样?如果只是今天出现这一次,正如楼上所说,很有可能是系统进气泡;如果每天都这样,我觉得是仪器出了问题,你用这样的流动相系统压力多少,我估计液相泵的密封圈不是很好了,很有可能有点漏液,或者漏气,也有可能系统某个部位或者整个系统很脏了,建议首先清洗下系统看看,然后在检查下泵处是不是有问题
我为新生
6楼2009-06-20 14:32:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

谢谢各位的建议!
流速0.3ml/min,基线呈现规律性锯齿状,上下波动达到30mv;当流速调到0.5ml/min时,基线平直。连接RP柱,采用相同的色谱条件,谱图未出现此现象,基线平直。怎么来解决这个问题啊?
7楼2009-06-20 14:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜


jsys(金币+1,VIP+0):感谢参与! 6-21 10:37
引用回帖:
Originally posted by zhaojunji06 at 2009-6-20 14:39:
谢谢各位的建议!
流速0.3ml/min,基线呈现规律性锯齿状,上下波动达到30mv;当流速调到0.5ml/min时,基线平直。连接RP柱,采用相同的色谱条件,谱图未出现此现象,基线平直。怎么来解决这个问题啊?

是不是阻尼器有点问题呢?0.3流速与0.5流速除了压力就是输压频率不一样了!!
我为新生
8楼2009-06-20 14:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

非常感谢 happy169!
不知能否加上我的MSN(zhaojunji06@hotmail.com),详细向你请教下?
9楼2009-06-20 15:32:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

只是在使用waters柱子,在流速0.3ml/min的条件下才会出现锯齿状.
如果是仪器体系的问题的话,我们在采用流通管代替柱子时,其他色谱条件不变,基线平直.出现特异情况后,采用RP-色谱柱时,流速1.0,仪器运行正常。应该可以排除泵或检测器中气泡的影响.
由于流速较低,正常状况下系统泵压为78,现在的泵压不稳(从0变成78,再从78变成0),呈现规律性的变化.
不知道有没有哪位遇到过同样的问题?
10楼2009-06-20 15:56:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhaojunji06 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +34 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 36/1800 2026-08-13 22:45 by jBlZNDB0Qx9J
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 10/500 2026-08-13 20:42 by hmhminy
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见