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hj122

金虫 (小有名气)

[交流] 求助:手提细菌质粒DNA会提出基因组DNA吗?

手提细菌质粒DNA会提出基因组DNA吗?
提取细菌总DNA后跑胶只有一条带是因为没有质粒吗?
细菌总DNA一般有几条带?

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-15 at 15:08 ]
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~


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1、有可能提到基因组,加溶液3时会有基因组沉淀,但是如果长时间的碱性会打断基因组DNA,基因组就会有可能沉淀不了。
2、只有一条带也可能是你所提取的质粒质量分常好。
3、一般DNA会出现三条带,超螺旋的、线性的和开环的。
平和悦衲!
2楼2009-06-18 22:19:09
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
碱裂解法提取的质粒会有复制中间体出现
3楼2009-06-18 22:44:05
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hj122

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by haoqian6135 at 2009-6-18 22:19:
1、有可能提到基因组,加溶液3时会有基因组沉淀,但是如果长时间的碱性会打断基因组DNA,基因组就会有可能沉淀不了。
2、只有一条带也可能是你所提取的质粒质量分常好。
3、一般DNA会出现三条带,超螺旋的、线性 ...

现在的问题是我怀疑这株菌里没有质粒,所以利用提取质粒的方法提出的可能只是基因组DNA,为了进一步证实,我提取了总DNA发现只有一条带,这是不是证实了我的想法,也就是这株菌只有基因组DNA,没有质粒
4楼2009-06-18 22:50:19
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

这个可难办了,你不知道里面含有不含质粒。有的质粒超级大的,达到200kb这样的话,很有可能跑出来电泳结果是和基因组DNA一条带啊。

当然,如果你可以确定质粒比较小的话,那基本上你的想法就是正确的。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2009-06-18 23:58:04
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
当然会有残留,不过量多少与技术有关
6楼2009-06-19 07:30:36
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林祎

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
技术好可以做到没有基因组DNA
7楼2009-06-19 10:13:16
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aga0110125

银虫 (小有名气)


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手提和试剂盒提的原理是一样的,没什么提不出,只不过说试剂盒一般用柱或磁珠(DNA和蛋白的分离,手提一般用酚氯仿抽提),能简单方便得到纯度较高的DNA而已
8楼2009-06-19 10:34:40
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