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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：手提细菌质粒DNA会提出基因组DNA吗？
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hj122

金虫 (小有名气)

[交流] 求助：手提细菌质粒DNA会提出基因组DNA吗？

手提细菌质粒DNA会提出基因组DNA吗？
提取细菌总DNA后跑胶只有一条带是因为没有质粒吗？
细菌总DNA一般有几条带？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-15 at 15:08 ]
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1楼 2009-06-18 22:01:53
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛～
★
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1、有可能提到基因组，加溶液3时会有基因组沉淀，但是如果长时间的碱性会打断基因组DNA，基因组就会有可能沉淀不了。
2、只有一条带也可能是你所提取的质粒质量分常好。
3、一般DNA会出现三条带，超螺旋的、线性的和开环的。
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平和悦衲！
2楼2009-06-18 22:19:09
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
碱裂解法提取的质粒会有复制中间体出现
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3楼2009-06-18 22:44:05
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hj122

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by haoqian6135 at 2009-6-18 22:19:
1、有可能提到基因组，加溶液3时会有基因组沉淀，但是如果长时间的碱性会打断基因组DNA，基因组就会有可能沉淀不了。
2、只有一条带也可能是你所提取的质粒质量分常好。
3、一般DNA会出现三条带，超螺旋的、线性 ...

现在的问题是我怀疑这株菌里没有质粒，所以利用提取质粒的方法提出的可能只是基因组DNA,为了进一步证实，我提取了总DNA发现只有一条带，这是不是证实了我的想法，也就是这株菌只有基因组DNA，没有质粒
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4楼2009-06-18 22:50:19
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
这个可难办了，你不知道里面含有不含质粒。有的质粒超级大的，达到200kb这样的话，很有可能跑出来电泳结果是和基因组DNA一条带啊。

当然，如果你可以确定质粒比较小的话，那基本上你的想法就是正确的。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2009-06-18 23:58:04
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
★
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当然会有残留，不过量多少与技术有关
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6楼2009-06-19 07:30:36
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林祎

木虫 (正式写手)
★
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技术好可以做到没有基因组DNA
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7楼2009-06-19 10:13:16
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aga0110125

银虫 (小有名气)
★
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手提和试剂盒提的原理是一样的，没什么提不出，只不过说试剂盒一般用柱或磁珠（DNA和蛋白的分离，手提一般用酚氯仿抽提），能简单方便得到纯度较高的DNA而已
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8楼2009-06-19 10:34:40
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