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li_wyman

金虫 (小有名气)

[交流] PCR产物TA克隆后检测是用原来PCR的引物吗

PCR产物TA克隆后检测是用原来PCR的引物吗?我用全式金的克隆试剂盒,没有蓝斑,全是白斑对吗?今天我挑了10个单菌落,用20 ul ddH2O 悬浮,取2 ul 用原来PCR的引物检测没有一个阳性。
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lynn5180

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好用M13的序列如下
M13 forward        5‘ GTAAAACGACGGCCAG3’
M13 reverse          5'- CAGGAAACAGCTATGAC
我们经常用来做菌液或菌落PCR省时省力
8楼2009-06-18 12:40:15
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

可以用原来的引物
2楼2009-06-16 18:39:25
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该做菌落pcr,如果是puc系列载体,用M13引物作pcr
3楼2009-06-16 18:49:58
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li_wyman

金虫 (小有名气)

原来的引物 也应该扩出来吧
4楼2009-06-16 19:38:37
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