| 查看: 585 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
caiqingchong木虫 (著名写手)
|
[交流]
还是基因敲除的问题（？？？）
|
||
|
现在构建一个敲除载体，用的是psup202，因为实在是没有合适的抗性标记可以再用了，因为菌株已经可以抗卡那霉素，而且需要转进去另一个抗性的质粒。 如图:我在AMP抗性基因内插入了要敲除基因的一段序列，然后在这段序列里面单切后又插入了AMP抗性基因（原来载体上的AMP插入失活了，再另插入这个基因，就又可以做筛选标记了，就是这么想的。注：没有别的抗性基因可选了。）。可是现在是每当连接新的amp基因后，总能转化出部分菌落，在amp抗性下长的很好，可提取质粒后大小完全不对，比预想的要小很多，这是怎么回事呢，难道，连接进去的amp基因把我连接到载体上的要敲除的基因序列给置换下来了吗，应该不会的吧？ 大家分析下到底是怎么回事呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有3人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有72人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
-
招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师
已经有3人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有23人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有7人回复
-
filecode
已经有12人回复
5楼2009-06-21 19:00:01
caiqingchong
木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2496.6
- 散金: 15
- 红花: 7
- 帖子: 1793
- 在线: 288.5小时
- 虫号: 264514
- 注册: 2006-07-08
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
2楼2009-06-18 09:14:06
guoxingjun2008
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 904.9
- 散金: 136
- 帖子: 372
- 在线: 75.8小时
- 虫号: 553723
- 注册: 2008-05-04
- 专业: 生物化学
3楼2009-06-18 11:05:56
克隆大虾
铁杆木虫 (著名写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 133 (高中生)
- 金币: 6067.9
- 散金: 236
- 红花: 10
- 帖子: 2374
- 在线: 1346.6小时
- 虫号: 93868
- 注册: 2005-09-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2009-06-18 11:09:16
