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2110601118

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】色谱柱拖尾

高人指教
我走的是缓冲盐,但是做上一段时间就会拖尾,用的是缓冲盐,有的时候要做七八十个样品,每次昨完该如何清洗?
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2110601118

银虫 (小有名气)

自己顶一下
2楼2009-06-15 16:56:09
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naren4545

木虫 (正式写手)

★ ★
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没有缓冲盐的流动相,再用纯有机相冲洗!
3楼2009-06-15 17:00:44
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pinyang8

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
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先用水冲冲柱子,然后逐步增加甲醇的量,直至到纯甲醇,然后用纯甲醇小流速慢慢冲柱子。
4楼2009-06-15 17:01:16
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qqkenyuan

木虫 (正式写手)

★ ★
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估计色谱柱不大行了,可能填料有些塌陷了,换根柱子吧
5楼2009-06-15 17:05:50
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2110601118

银虫 (小有名气)

谢谢各位高手,我已经换过好几个柱子了 有的时候还不行,最近弄了一个保护住 好像好一点了,我咨询一下,色谱柱冲洗大概用多大的流速,我的是250的柱子。
6楼2009-06-15 17:15:59
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜

★ ★
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引用回帖:
Originally posted by naren4545 at 2009-6-15 17:00:
没有缓冲盐的流动相,再用纯有机相冲洗!

你这样很容易误解啊!首先用水相比流动相多的水有机溶剂冲洗,再用有机相冲洗。
  冲洗是为了带盐流动相从柱子以及仪器中彻底置换出来,因为直接走有机相,盐类会在有机相中析出,堵塞系统(缓冲盐在有机相中溶解度一般较小)。最后用有机相冲洗,是将整个系统在有机环境中存放,水环境中容易有菌类生长。
我为新生
7楼2009-06-15 17:40:05
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜

引用回帖:
Originally posted by 2110601118 at 2009-6-15 17:15:
谢谢各位高手,我已经换过好几个柱子了 有的时候还不行,最近弄了一个保护住 好像好一点了,我咨询一下,色谱柱冲洗大概用多大的流速,我的是250的柱子。

走流动相的流速就可以吧
我为新生
8楼2009-06-15 17:40:39
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yangjianchun

木虫 (著名写手)

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使用缓冲盐作为流动相很是麻烦!毁柱子厉害。。

使用时必须严格按照规程进样、冲洗
越把事当事越是事!
9楼2009-06-15 18:03:09
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qwerasdf2783

金虫 (著名写手)

★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版 6-16 16:01
流速与柱子的长度无关,与内径有关。每种柱子都有最佳流速,说明纸上有。
冲柱子时可以略微加大流速,以不超过柱子耐受压力为好。
缓冲盐的话先用水冲,然后将水相的管也放到甲醇中,各50%冲洗。
10楼2009-06-15 23:35:17
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