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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶活测定问题
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200341021

金虫 (初入文坛)

[交流] 酶活测定问题

测定一个羟化酶的酶活，现在用总蛋白测。我的问题是，不知道哪种物质会让蛋白变性，一加进去之后蛋白就沉淀。加的有6磷酸葡萄糖，6磷酸葡萄糖脱氢酶，硫氧还蛋白，硫氧还蛋白还原酶，NADP+,还有底物，底物用乙腈溶解的。
实验过程还要注意一些什么问题，请高手赐教！

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-28 at 12:32 ]
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1楼 2009-06-15 14:40:30
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是有机溶剂乙腈使蛋白质变性了，换用别的溶剂溶解底物试一下！
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2楼2009-06-15 20:46:30
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200341021

金虫 (初入文坛)
多谢楼上的
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3楼2009-06-16 07:54:39
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biogefart

木虫 (著名写手)

不太可能吧

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这种情况一般不是100%的有机溶剂，最多10%
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闹太套
4楼2009-06-16 08:18:50
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200341021

金虫 (初入文坛)
我做过将乙腈加到我的蛋白中，加了很多量，也没看到有沉淀。我也不太清楚是不是这个问题。底物可不可以用DMSO溶解，对蛋白有什么作用吗？
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5楼2009-06-16 09:29:49
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delia1013

木虫 (著名写手)
用DMSO溶解后，加入整个体系的比例也不要超过4%
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6楼2009-06-24 19:50:08
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200341021

金虫 (初入文坛)
多谢了！
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7楼2009-07-06 09:36:05
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mayina

铜虫 (初入文坛)
thak you
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8楼2009-07-07 15:05:42
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