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200341021

金虫 (初入文坛)

[交流] 酶活测定问题

测定一个羟化酶的酶活,现在用总蛋白测。我的问题是,不知道哪种物质会让蛋白变性,一加进去之后蛋白就沉淀。加的有6磷酸葡萄糖,6磷酸葡萄糖脱氢酶,硫氧还蛋白,硫氧还蛋白还原酶,NADP+,还有底物,底物用乙腈溶解的。
实验过程还要注意一些什么问题,请高手赐教!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-28 at 12:32 ]
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200341021

金虫 (初入文坛)

我做过将乙腈加到我的蛋白中,加了很多量,也没看到有沉淀。我也不太清楚是不是这个问题。底物可不可以用DMSO溶解,对蛋白有什么作用吗?
5楼2009-06-16 09:29:49
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是有机溶剂乙腈使蛋白质变性了,换用别的溶剂溶解底物试一下!
2楼2009-06-15 20:46:30
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biogefart

木虫 (著名写手)

不太可能吧


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这种情况一般不是100%的有机溶剂,最多10%
闹太套
4楼2009-06-16 08:18:50
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delia1013

木虫 (著名写手)

用DMSO溶解后,加入整个体系的比例也不要超过4%
6楼2009-06-24 19:50:08
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