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danys1985

新虫 (小有名气)

[交流] 【请教】量子点标记抗原或抗体

各位大侠,请问有谁做过量子点标记抗原或半抗原的实验啊?有问题请教:

(1)我是参照Talanta上的一篇文献用NaTeO3为Te源,巯基乙酸(TGA)为稳定剂合成的CdTe量子点,Cd:Te:TGA=1:0.2:1.4;已经做过紫外、荧光、红外、电镜表征,均与相关文献报道的一致。
(2)但将其与抗原(BSA连接的氨基芘)或半抗原(乙醇溶解的氨基芘)用EDC/NHS偶联了很多次都没成功。
(3)具体实验过程是这样的:
EDC/NHS用量多的时候QDs会沉淀,
后来选择QDs浓度为6*10-6M、抗原浓度为5*10-5M、EDC/NHS量为6mM/4mM
pH7.4的磷酸缓冲液中反应4h,然后将反应产物用丙酮沉淀。拿沉淀做红外看到出现了酰胺键的峰,但没有BSA和氨基芘的峰;
沉淀再溶解后测荧光也只有QDs的峰(610nm,强度基本与原来一样)
没有氨基芘的峰(443nm)。
  (4)另外,在上述合适的浓度下,用超声波搅拌太长时间也会产生沉淀。
请大家帮忙看看问题出在哪啊?感激不尽!!!
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xiaolong3097

新虫 (著名写手)

牛,看不懂
爱人是路,朋友是猪,人生只有一条路,路上会有好多猪,有钱的时候别走错路,缺钱的时候别卖猪,幸福的时候别迷路,休息的时候喂喂猪.
2楼2009-06-14 21:55:54
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匿名

用户注销 (著名写手)

总版主

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大笨猪和聪明羊(金币+2,VIP+0): 6-15 09:44
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3楼2009-06-14 22:55:32
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天天过来

铁杆木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by baiyal2000 at 2009-6-14 22:55:
你怎么判断就没有偶联上呢?也可能是偶联上了只不过你不知道而已。

建议不要丙酮沉淀,用凝胶色谱柱吧,或者超滤离心管之类的东西。

沉淀说明量多了嘛,那你就加少一些吧。还有ph比较重要。

有道理……呵呵
Sucessisneverfinal,failureisneverfatal.Thecourage,thatcounts.
4楼2009-06-15 08:02:13
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webng

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
DDC和NHS你是按多少量来使用的?
5楼2009-06-17 19:28:16
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wuwt

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
怎么合成 NaTeO3 ?
有文献么?
6楼2009-06-18 01:02:37
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danys1985

新虫 (小有名气)

EDC、NHS的浓度分别为6mM、4mM
NaTeO3是买的
7楼2009-06-21 11:16:18
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zmrhjf

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

8楼2009-06-21 11:22:56
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danys1985

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by baiyal2000 at 2009-6-14 22:55:
你怎么判断就没有偶联上呢?也可能是偶联上了只不过你不知道而已。

建议不要丙酮沉淀,用凝胶色谱柱吧,或者超滤离心管之类的东西。

沉淀说明量多了嘛,那你就加少一些吧。还有ph比较重要。

如果偶联上了,应该同时出现量子点(610nm)和氨基芘(443nm)的荧光峰吧。pH是7.4,文献上都用这个pH值
9楼2009-06-21 11:25:47
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danys1985

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zmrhjf at 2009-6-21 11:22:
这个很牛啊

为什么这么说呢?我是研一的,又是第一次上小木虫,可能没把问题说得很清楚,包涵一下啦
10楼2009-06-21 11:30:08
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