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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 【请教】量子点标记抗原或抗体
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danys1985

新虫 (小有名气)

[交流] 【请教】量子点标记抗原或抗体

各位大侠，请问有谁做过量子点标记抗原或半抗原的实验啊？有问题请教：

（1）我是参照Talanta上的一篇文献用NaTeO3为Te源，巯基乙酸(TGA)为稳定剂合成的CdTe量子点，Cd：Te：TGA=1：0.2：1.4；已经做过紫外、荧光、红外、电镜表征，均与相关文献报道的一致。
（2)但将其与抗原（BSA连接的氨基芘）或半抗原（乙醇溶解的氨基芘）用EDC/NHS偶联了很多次都没成功。
（3）具体实验过程是这样的：
EDC/NHS用量多的时候QDs会沉淀，
后来选择QDs浓度为6*10-6M、抗原浓度为5*10-5M、EDC/NHS量为6mM/4mM
pH7.4的磷酸缓冲液中反应4h，然后将反应产物用丙酮沉淀。拿沉淀做红外看到出现了酰胺键的峰，但没有BSA和氨基芘的峰；
沉淀再溶解后测荧光也只有QDs的峰（610nm，强度基本与原来一样）
没有氨基芘的峰（443nm）。
  (4)另外，在上述合适的浓度下，用超声波搅拌太长时间也会产生沉淀。
请大家帮忙看看问题出在哪啊？感激不尽！！！
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1楼 2009-06-14 19:38:49
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xiaolong3097

新虫 (著名写手)
牛，看不懂
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爱人是路，朋友是猪，人生只有一条路，路上会有好多猪，有钱的时候别走错路，缺钱的时候别卖猪，幸福的时候别迷路，休息的时候喂喂猪.
2楼2009-06-14 21:55:54
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匿名

用户注销 (著名写手)

总版主
★ ★ ★
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大笨猪和聪明羊(金币+2,VIP+0): 6-15 09:44
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3楼2009-06-14 22:55:32
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天天过来

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by baiyal2000 at 2009-6-14 22:55:
你怎么判断就没有偶联上呢？也可能是偶联上了只不过你不知道而已。

建议不要丙酮沉淀，用凝胶色谱柱吧，或者超滤离心管之类的东西。

沉淀说明量多了嘛，那你就加少一些吧。还有ph比较重要。

有道理……呵呵
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Sucessisneverfinal,failureisneverfatal.Thecourage,thatcounts.
4楼2009-06-15 08:02:13
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webng

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DDC和NHS你是按多少量来使用的？
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5楼2009-06-17 19:28:16
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wuwt

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
怎么合成 NaTeO3 ？
有文献么？
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6楼2009-06-18 01:02:37
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danys1985

新虫 (小有名气)
EDC、NHS的浓度分别为6mM、4mM
NaTeO3是买的
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7楼2009-06-21 11:16:18
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zmrhjf

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2009-06-21 11:22:56
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danys1985

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by baiyal2000 at 2009-6-14 22:55:
你怎么判断就没有偶联上呢？也可能是偶联上了只不过你不知道而已。

建议不要丙酮沉淀，用凝胶色谱柱吧，或者超滤离心管之类的东西。

沉淀说明量多了嘛，那你就加少一些吧。还有ph比较重要。

如果偶联上了，应该同时出现量子点（610nm）和氨基芘(443nm)的荧光峰吧。pH是7.4，文献上都用这个pH值
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9楼2009-06-21 11:25:47
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danys1985

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zmrhjf at 2009-6-21 11:22:
这个很牛啊

为什么这么说呢？我是研一的，又是第一次上小木虫，可能没把问题说得很清楚，包涵一下啦
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10楼2009-06-21 11:30:08
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